Ficoll

Składniki Ficoll

Ficoll jest obojętnym, silnie rozgałęzionym, hydrofilowym polisacharydem o dużej masie , który łatwo rozpuszcza się w roztworach wodnych . Promienie Ficolla mieszczą się w zakresie od 2 do 7 nm. Otrzymuje się go w reakcji polisacharydu z epichlorohydryną . Ficoll jest zastrzeżonym znakiem towarowym należącym do firm GE Healthcare.

Ficoll jest częścią Ficoll-Paque, który jest używany w laboratoriach biologicznych do rozdzielania krwi na jej składniki ( erytrocyty , leukocyty itp.). Ficoll-Paque jest zwykle umieszczany na dnie stożkowej probówki, a następnie powoli nakładana jest warstwa krwi na Ficoll-Paque. Po odwirowaniu w probówce stożkowej widoczne będą następujące warstwy, od góry do dołu: osocze i inne składniki, warstwa komórek jednojądrzastych zwana kożuszkiem leukocytarnym ( PBMC / MNC), Ficoll-Paque oraz erytrocyty i granulocyty , które powinny być obecne w postaci peletek. Ta separacja umożliwia łatwe zbieranie PBMC. w warstwie PBMC lub Ficoll-Paque może wystąpić pewne pułapkowanie krwinek czerwonych (obecność erytrocytów i granulocytów). Czasami w warstwie PBMC może wystąpić duże krzepnięcie krwi . Czterooctan etylenodiaminy ( EDTA ) i heparyna są powszechnie stosowane w połączeniu z Ficoll-Paque™ w celu zapobiegania krzepnięciu i jako separator komórek jednojądrzastych.

W pewnym momencie, dość wcześnie w badaniach nad leczeniem cukrzycy przez przeszczep, Ficoll był używany do próby oddzielenia wysepek Langerhansa od tkanki ludzkiej trzustki trawionej enzymem (kolagenazą). Teoria głosiła, że ​​oddzielone wysepki można następnie wykorzystać do przeszczepienia pacjentom z cukrzycą typu 1 . W praktyce stosowanie Ficoll prowadziło do trudności w uzyskaniu wystarczająco czystego preparatu wysepek, z wystarczającą ilością odzyskanych wysepek z oryginalnej tkanki, do bezpiecznego i skutecznego przeszczepu wysepek u ludzi.

Ponieważ nakładanie warstw Ficoll-Paque jest bardzo powolnym procesem, opracowano urządzenia, które pomagają w najbardziej czasochłonnym etapie, jakim jest nakładanie. Jednym z takich produktów jest SepMate-50, specjalistyczna tuba zawierająca porowatą wkładkę, która tworzy fizyczną barierę pomiędzy Ficoll-Paque a próbką krwi. Pozwala to na szybkie naniesienie próbki krwi na wkładkę, bez konieczności nakładania jej bezpośrednio na Ficoll-Paque. Wkładka SepMate skraca również czas trwania etapu wirowania, a po odwirowaniu górną warstwę zawierającą osocze i PBMC można wlać do nowej probówki. Inne urządzenia obejmują kolumnę zawierającą porowatą z polietylenu o dużej gęstości lub „frytę”. Produkty te umożliwiają znacznie szybsze nakładanie warstw krwi bez mieszania polisacharydu i krwi. Przykładem takiego produktu jest „Accuspin System Histopaque-1077” sprzedawany przez firmę Sigma Aldrich. Koszt tego produktu jest znacznie wyższy niż podstawowych produktów Ficoll i Ficoll-Paque. Możliwe jest również dołączenie systemu separacji Ficoll-Paque do Vacutainera używanego do pobierania krwi. Takie Vacutainery zwiększają wygodę i bezpieczeństwo pobierania produktów krwiopochodnych, ale kosztują 50 razy więcej niż podstawowy Vacutainer.

Zobacz też

• Ficoll na wiki naukowca życia OpenWetWare

Linki zewnętrzne

• Pożywki do separacji komórek, podręcznik metodologii i aplikacji zarchiwizowany 2008-12-05 w Wayback Machine