Klonowanie wyrażeń

Klonowanie ekspresyjne to technika klonowania DNA , która wykorzystuje wektory ekspresyjne do generowania biblioteki klonów, przy czym każdy klon wyraża jedno białko . Ta biblioteka ekspresyjna jest następnie przeszukiwana pod kątem właściwości będącej przedmiotem zainteresowania i klony będące przedmiotem zainteresowania są odzyskiwane do dalszej analizy. Przykładem może być wykorzystanie biblioteki ekspresyjnej do izolowania genów, które mogą nadawać oporność na antybiotyki .

Wektory ekspresyjne

Wektory ekspresyjne są wyspecjalizowanym typem wektora do klonowania , w którym sygnały transkrypcyjne i translacyjne potrzebne do regulacji genu będącego przedmiotem zainteresowania są zawarte w wektorze do klonowania. Sygnały transkrypcyjne i translacyjne mogą być tworzone syntetycznie, aby ułatwić regulację ekspresji genu będącego przedmiotem zainteresowania.

Zamiar

Zazwyczaj ostatecznym celem klonowania ekspresyjnego jest wytworzenie dużych ilości specyficznych białek . W tym celu bakteryjny klon ekspresyjny może zawierać miejsce wiązania rybosomu ( sekwencja Shine-Dalgarno ) w celu wzmocnienia translacji mRNA interesującego genu, sekwencję terminacji transkrypcji lub, u eukariontów , specyficzne sekwencje promujące potranslacyjną modyfikację produkt białkowy.

Zobacz też