Super optymalny bulion

Super Optimal Broth ( pożywka SOB ) jest bogatą w składniki odżywcze pożywką bakteryjną stosowaną do hodowli mikrobiologicznej , głównie Escherichia coli . Ten bogaty w składniki odżywcze bulion mikrobiologiczny zawiera peptydy , aminokwasy, witaminy rozpuszczalne w wodzie i glukozę w preparatach o niskiej zawartości soli. Został opracowany przez Douglasa Hanahana w 1983 roku i jest dostosowaną wersją powszechnie używanej pożywki LB ( bulion lizogeniczny ). Wzrost E. coli w pożywce SOB lub SOC skutkuje wyższą wydajnością transformacji plazmidów . Podłoże SOC można również stosować do regeneracji Klebsiella oxytoca w celu poprawy wydajności transformacji.

Bulion Super Optimal z represją katabolitową ( SOC ) to SOB z dodatkiem glukozy .

Kompozycja

(Liczby w nawiasach to masy potrzebne do wytworzenia 1 litra pożywki)

SZLOCH

2% w/v tryptonu (20 g)
0,5% w/v Ekstrakt drożdżowy (5 g)
8,56 mM NaCl (0,5 g) lub 10 mM NaCl (0,584 g)
2,5 mM KCl (0,186 g)
_dd H2O _do 1000 ml
10 mM _MgCl2 ( bezwodny: 0,952 g; heksahydrat: 2,033 g) I 10 mM _MgSO4 ( bezwodny: 1,204 g; siedmiowodny: 2,465 g)

SOC

Oprócz zawartości SOB, SOC zawiera również 20mM glukozę (3,603 g)

Alternatywnie, SOB i SOC można wytworzyć, dodając niewielkie ilości stężonych roztworów chlorku magnezu i glukozy do wcześniej przygotowanego SOB.

Regulacja pH

W celu uzyskania maksymalnej skuteczności pożywki SOB/SOC należy doprowadzić do pH 7,0 przez dodanie stężonego wodorotlenku sodu . Oryginalna literatura podaje, że pH końcowej pożywki powinno wynosić od 6,8 do 7,0.

Sterylizacja

Na koniec pożywkę SOB należy wysterylizować w autoklawie w temperaturze 121°C, aby zapewnić sterylność . Składniki pożywki SOC nie powinny być sterylizowane razem w autoklawie, ponieważ wysoka temperatura może spowodować reakcję glukozy z peptydami trypsynowymi (patrz reakcja Maillarda ), obniżając jakość. SOB oraz roztwory dodatku magnezu i glukozy można sterylizować oddzielnie w autoklawie, a następnie mieszać do uzyskania końcowego stężenia. Kompletny SOC można sterylizować przez filtrację przez filtr 0,22 μm.