Próba Biala
| Klasyfikacja | Metoda kolorymetryczna |
|---|---|
| Anality | Pentozy |
Test Biala jest chemicznym testem na obecność pentoz . Jej nazwa pochodzi od Manfreda Biala , niemieckiego lekarza. Składniki obejmują orcinol , kwas solny i chlorek żelazowy . Pentoza, jeśli jest obecna, ulegnie odwodnieniu, tworząc furfural , który następnie reaguje z orcynolem, tworząc barwną substancję. Roztwór zmieni kolor na niebieskawy i może wytrącić się osad. Rozwiązanie pokazuje dwa pasma absorpcji , jedno na czerwono między liniami Fraunhofera B i C, a drugie w pobliżu linii D. Oszacowania odpowiednich długości fal można dokonać, odwołując się do artykułu o liniach Fraunhofera .
Kompozycja
Odczynnik Biala składa się z 0,4 g orcynolu , 200 ml stężonego kwasu solnego i 0,5 ml 10% roztworu chlorku żelazowego. Test Biala służy do odróżnienia pentoz od heksoz; to rozróżnienie opiera się na kolorze, który rozwija się w obecności orcynolu i chlorku żelaza (III). Furfural z pentoz daje kolor niebieski lub zielony. Pokrewny hydroksymetylofurfural z heksoz może dawać błotnisto-brązowy, żółty lub szary roztwór, ale można go łatwo odróżnić od zielonego koloru pentoz.
Wersja ilościowa
Badanie można przeprowadzić jako ilościowe badanie kolorymetryczne przy użyciu spektrofotometru . Fernell i King opublikowali procedurę jednoczesnego oznaczania pentoz i heksoz z pomiarów przy dwóch długościach fali. Różne wersje tego testu są szeroko stosowane do szybkiego chemicznego oznaczania RNA ; w tym kontekście jest to zwykle nazywane testem orcynolowym.
- ^ Baldwin, E. and Bell, DJ, Cole's Practical Physiological Chemistry , opublikowane przez Heffer, Cambridge, 1955, strona 189
- ^ Baldwin i Bell, strona 189
- Bibliografia _ Król, HK (1953). „Jednoczesne oznaczanie pentozy i heksozy w mieszaninach cukrów”. Analityk (78): 80–83.
- Bibliografia _ Phillips, JA (1981). „Skład chemiczny”. W Phillip Gerhardt (red.). Podręcznik metod dla bakteriologii ogólnej . Amerykańskie Towarzystwo Mikrobiologiczne . P. 349.