Test ATPazy

Test ATPazy jest testem membranowym , który pośrednio mierzy aktywność transporterów wypływowych . Kaseta wiążąca ATP lub transportery wypływowe pośredniczą w transporcie substratów przez błony komórkowe wbrew gradientowi stężeń . Rozszczepienie ATP jest ściśle związane z translokacją substratu, ponieważ energia translokacji substratu pochodzi z hydrolizy ATP . Hydroliza ATP daje nieorganiczny fosforan (Pi), który można zmierzyć za pomocą prostej reakcji kolorymetrycznej. Ilość uwolnionego Pi jest wprost proporcjonalna do aktywności transportera.

Zastosowanie testu ATPazy

Test ATPazy ma na celu wskazanie natury interakcji między związkiem a transporterem . Testy ATPazy są używane w dwóch różnych trybach: aktywacji ATPazy i hamowania ATPazy. Transportowane substraty zwiększają wyjściową aktywność ATPazy, podczas gdy inhibitory lub wolno transportowane związki hamują wyjściową aktywność ATPazy i/lub aktywność ATPazy mierzoną w obecności czynnika stymulującego. Testy ATPazy mogą zatem potencjalnie określać, czy związek działa jako substrat i/lub inhibitor transportera.

Mutacje w domenie ATPazy powodują utratę funkcji transportowej. Aktywność transportera wielolekowego w komórkach lekoopornych jest związana z szybkim wyczerpaniem komórkowego ATP, gdy synteza ATP jest hamowana.