Cytologia pochwy
Cytologia pochwy to mikroskopowe badanie komórek nabłonka pochwy . W medycynie weterynaryjnej pomaga rozróżnić etapy cyklu rujowego ssaków , ponieważ nabłonek pochwy zmienia się w odpowiedzi na poziom hormonów płciowych ; praktycznie służy do rozróżnienia, kiedy samica psa znajduje się w określonym punkcie cyklu rujowego. W prawidłowym rozmazie z pochwy komórki laktacyjne, komórki trzeszczki , komórki szyjki macicy, komórki endometrium, komórki trofoblastyczne i mogą występować leukocyty .
Cytologia pochwy pozwala klinicyście na:
- Ustal, czy pies rzeczywiście jest w rui .
- Pomoc w określeniu właściwego czasu rozpoczęcia wykonywania droższych testów progesteronu w surowicy i hormonu luteinizującego (LH) w celu dokładnego określenia czasu owulacji .
- Ustal, czy w cyklu rujowym nie jest za późno na sztuczne zapłodnienie u psów, które nie mogą lub nie chcą rozmnażać się w sposób naturalny.
- Ustal, czy suka jest pod wpływem estrogenu.
- Wytypuj właściwy dzień wykonania planowego cięcia cesarskiego .
Sprzęt potrzebny do cytologii pochwy obejmuje wziernik pochwy , aplikatory z bawełnianymi końcówkami, matowe szkiełka mikroskopowe , komercyjny barwnik Romanowsky'ego i mikroskop świetlny .
Rodzaje komórek
- Komórki podstawne - dają początek całemu nabłonkowi w rozmazie z pochwy. Są to małe komórki z okrągłymi jądrami i wysokim stosunkiem jądra do cytoplazmy (N:C). Rzadko się je obserwuje.
- Komórki przypodstawne - najmniejsze komórki nabłonkowe widoczne w typowym rozmazie z pochwy i pochodzą z warstwy podstawnej komórek nabłonka płaskiego . Są okrągłe lub prawie okrągłe i mają wysoki stosunek jądra do cytoplazmy (N:C). Cytoplazma jest gęsta i zasadochłonna . Jądro ma drobnoziarnistą chromatynę i jest pęcherzykowate.
- Komórki pośrednie - dwa do trzech razy większe niż komórki przypodstawne, ale ich jądra są podobne pod względem wielkości do jąder komórek przypodstawnych. Małe komórki pośrednie są okrągłe lub prawie okrągłe z dużym widocznym jądrem. Duże komórki pośrednie, zwane także powierzchownymi komórkami pośrednimi lub przejściowymi komórkami pośrednimi, mają kształt wielokąta i mały stosunek N:C.
- Komórki powierzchowne (martwe komórki) – największe komórki obserwowane w cytologii pochwy i pochodzą z najbardziej zewnętrznej warstwy niezrogowaciałych komórek nabłonka. Mają kształt wielokąta, są płaskie i często wyglądają jak zwinięte. Jądra są nieobecne lub pyknotyczne , co oznacza, że są małe i ciemne. Cytoplazma może rozwijać małe wakuole w miarę starzenia się komórek. Rogowacenie to proces degeneracji do tych dużych, płaskich, pozbawionych jąder komórek. Powierzchowne komórki bez jąder uważa się za całkowicie zrogowaciałe.
- Komórki Metestrum - komórki nabłonka pochwy zawierające neutrofile w cytoplazmie. Chociaż ich nazwa sugeruje, że są widoczne podczas metestrus , komórki te nie są specyficzne dla żadnego etapu rui.
- Komórki piankowate - czasami widoczne podczas anestrus i są po prostu nieokreślonymi komórkami z dużymi wakuolami.
Obserwowalne komórki na każdym etapie cyklu rujowego
Proestrus
- Wczesna do środkowej fazy rui — na tym etapie cytologia pochwy wykaże stopniowe przejście od komórek przypodstawnych do komórek pośrednich i do komórek powierzchownych. Obecne są również neutrofile i krwinki czerwone w dużych ilościach. Czerwone krwinki są wynikiem proliferacji nabłonka pochwy spowodowanej podwyższonym poziomem estrogenu . Komórki mogą unosić się w zasadochłonnym śluzie .
- Późna proestrus - następuje spadek liczby neutrofili, ponieważ nie są one w stanie przejść przez pogrubiającą ścianę pochwy. Cytologia składa się głównie z dużych komórek pośrednich i powierzchownych. Mogą być obecne czerwone krwinki i bakterie .
Ruja
Ruja charakteryzuje się obecnością wszystkich komórek powierzchownych, z których wiele jest bezjądrowych (bez jądra) lub ma małe, pyknotyczne jądra i mogą być obecne krwinki czerwone wraz z bakteriami. Nie widać neutrofili, chyba że występuje stan zapalny . Zwykle nie ma śluzu w tle.
Diestrus
W diestrus komórki powierzchowne są zastępowane przez komórki przypodstawne i pośrednie w ciągu jednego do dwóch dni od początku. Neutrofile są zwiększone. Czerwone krwinki mogą być nieobecne lub obecne. Powszechnie obserwuje się bakterie. Rozmaz lub środkowej fazie rui.
Anestrus
Ostatnim etapem rui jest anestrus , który charakteryzuje się głównie niezrogowaciałymi komórkami nabłonka płaskonabłonkowego, takimi jak komórki pośrednie lub przypodstawne. Komórki są mniejsze, mają zasadochłonną cytoplazmę i duże okrągłe jądra. Mogą być jakieś neutrofile, ale nie ma czerwonych krwinek. Ogólna komórkowość jest niska.