Cytowirówka
Cytowirówka , czasami określana jako cytowirówka , jest wyspecjalizowaną wirówką używaną do zagęszczania komórek w płynnych próbkach na szkiełku mikroskopowym , aby można je było barwić i badać. Cytowirówki znajdują zastosowanie w różnych obszarach laboratorium klinicznego , takich jak cytopatologia , hematologia i mikrobiologia , a także w badaniach biologicznych. Metodę można stosować do wielu różnych typów próbek, w tym do aspiratów cienkoigłowych , płynu mózgowo-rdzeniowego , płynu surowiczego i maziowego oraz moczu .
Procedura
Aby przygotować rozmazy z cytowirówki, do przedniej części szkiełka mikroskopowego przymocowany jest zespół lejka. Powierzchnia zespołu lejka, która styka się ze szkiełkiem, jest wyłożona bibułą filtracyjną w celu wchłonięcia nadmiaru płynu. Do lejka wlewa się kilka kropel płynu. Zestaw umieszcza się w cytowirówce, która działa przy niskiej sile (600–800 xg), aby zachować strukturę komórkową. Siła odśrodkowa przepycha płyn przez otwór lejka i skupia komórki na niewielkim obszarze szkiełka. Proces wirowania skupia komórki około dwudziestokrotnie i tworzy monowarstwę o grubości jednej komórki, co pozwala na ocenę morfologii komórek. Slajd można następnie utrwalić i poplamić.
Aplikacje
Niektóre zastosowania cytowirówek obejmują:
- Wykonywanie różnicowego liczenia komórek w płynach ustrojowych, takich jak płyn surowiczy , maziowy i mózgowo-rdzeniowy
- cytopatologiczne próbek płynnych, takich jak płyny ustrojowe i aspiraty cienkoigłowe
- Barwienie metodą Grama próbek płynów w celu identyfikacji mikroorganizmów
Ograniczenia
Proces cytowirowania może powodować zniekształcenie komórek. Komórki znajdujące się w środku rozmazu mogą wyglądać na skompresowane w porównaniu z komórkami na obrzeżach. Jądra komórkowe mogą tworzyć sztuczne szczeliny, płaty lub dziury, a cytoplazma może wyglądać na wakuolowaną lub tworzyć nieregularne projekcje. Granulki cytoplazmatyczne mogą być wypchnięte na obrzeża komórki. Jeśli liczba komórek jest wysoka, komórki mogą być zniekształcone z powodu stłoczenia; dlatego próbki z dużą liczbą komórek są rozcieńczane przed przygotowaniem rozmazu.
Historia
Badanie komórek w płynach ustrojowych było historycznie przeprowadzane za pomocą hemocytometru , komory przeznaczonej do mikroskopowego zliczania komórek. Ta technika była ograniczona przez słabe rozróżnianie typów komórek (komórki można było sklasyfikować tylko jako jednojądrzaste lub polimorfojądrowe) oraz małą liczbę komórek obecnych w nieskoncentrowanych płynach ustrojowych. Co więcej, ta technika nie dała trwałego zapisu okazu. W artykule z 1966 roku Watson P. opisał pierwszą cytowirówkę, nazywając ją „urządzeniem do zagęszczania komórek w zawiesinie na szkiełku mikroskopowym”. Urządzenie było sprzedawane komercyjnie w latach 70., aw 1983 zostało opatentowane przez firmę Shandon (obecnie Thermo Scientific ). Od 2012 roku na rynku istnieje wiele marek cytowirówek.