Płodowa surowica bydlęca
Płodowa surowica bydlęca ( FBS ) pochodzi z krwi pobranej od płodu bydlęcego w zamkniętym systemie pobierania w rzeźni . Płodowa surowica bydlęca jest najczęściej stosowanym suplementem surowicy do hodowli komórkowej komórek eukariotycznych in vitro . Wynika to z tego, że ma bardzo niski poziom przeciwciał i zawiera więcej czynników wzrostu , co pozwala na wszechstronność w wielu różnych zastosowaniach w hodowli komórkowej.
Białko globularne , albumina surowicy bydlęcej (BSA), jest głównym składnikiem płodowej surowicy bydlęcej. Bogata różnorodność białek w płodowej surowicy bydlęcej utrzymuje hodowane komórki w pożywce, w której mogą przeżyć, rosnąć i dzielić się.
Ponieważ jest to produkt biologiczny, FBS nie jest w pełni zdefiniowanym składnikiem pożywki i jako taki różni się składem pomiędzy partiami. W wyniku tego oraz w celu zminimalizowania możliwości przeniesienia przypadkowych czynników, opracowano niezawierające surowicy i chemicznie zdefiniowane podłoża (CDM). Skuteczność pożywek bez surowicy jest jednak ograniczona, ponieważ wiele linii komórkowych nadal wymaga surowicy do wzrostu, a wiele preparatów pożywek bez surowicy może wspierać wzrost tylko wąsko zdefiniowanych typów komórek.
Produkcja
FBS jest produktem ubocznym przemysłu mięsnego. FBS, podobnie jak zdecydowana większość surowicy zwierzęcej stosowanej w hodowli komórkowej, jest wytwarzany z krwi pobieranej w komercyjnych rzeźniach od bydła, które również dostarcza mięso przeznaczone do spożycia przez ludzi. „Kodeks zdrowia zwierząt lądowych” . Źródło 2021-12-10 .
Pierwszym etapem procesu produkcji FBS jest pobranie krwi z płodu bydlęcego po usunięciu płodu z ubitej krowy. Krew zbiera się aseptycznie do sterylnego pojemnika lub worka na krew, a następnie pozostawia się do skrzepnięcia. Normalną metodą pobierania jest nakłucie serca, w którym igła jest wprowadzana do serca. Minimalizuje to niebezpieczeństwo zanieczyszczenia surowicy mikroorganizmami pochodzącymi z samego płodu i środowiska. Następnie odwirowuje się ją w celu usunięcia skrzepu fibryny i pozostałych krwinek z jasnożółtej (słomkowej) surowicy. Surowica jest zamrażana przed dalszą obróbką, która jest niezbędna, aby nadawała się do hodowli komórkowej. „Charakterystyka i kwalifikacja substratów komórkowych i innych materiałów biologicznych stosowanych w produkcji szczepionek wirusowych do wskazań na choroby zakaźne” . Administracja Żywności i Leków . Źródło 2021-12-10 .
Drugi etap przetwarzania obejmuje filtrację, zwykle przy użyciu łańcucha filtracyjnego, przy czym filtracja końcowa składa się z trzech sterylnych filtrów membranowych 0,1 mikrona. Aseptycznie przetwarzany FBS jest poddawany rygorystycznym testom kontroli jakości i jest dostarczany ze szczegółowym Certyfikatem Analizy. Certyfikat zawiera pełne wyniki badań oraz informację o pochodzeniu serum. Certyfikaty analizy różnią się w zależności od dostawcy komercyjnego, ale każdy zwykle zawiera następujące szczegóły: oświadczenie o filtracji, kraj pobrania krwi, kraj produkcji, badanie wydajności wzrostu komórek, badanie sterylności mikrobiologicznej, a także badania przesiewowe w kierunku mykoplazmy i wirusa, endotoksyn , hemoglobiny , Testy gamma-glutamylotransferazy IgG i białka całkowitego. FBS można również przetestować pod kątem kraju pochodzenia.
Etyka
Podniesiono kwestie etyczne dotyczące procesu pobierania krwi ze względu na potencjalne cierpienie płodu. Odbyła się dyskusja dotycząca metodologii pobierania płodowej surowicy bydlęcej. Międzynarodowe Stowarzyszenie Przemysłu Surowic (ISIA) opublikowało literaturę zawierającą szczegółowe informacje na temat obszernych przepisów i procesów stosowanych w celu zapewnienia, że surowica jest pobierana w sposób etyczny. Chociaż akt uboju matki i czas, który upływa w procesie uboju przed pobraniem, spowoduje utratę przytomności lub śmierć płodu przed pobraniem surowicy, postuluje się, że ekspozycja żywych nienarodzonych cieląt na tlen może spowodować, że nabiorą one świadomości przed zabiciem, co doprowadziło do aktywnej debaty na temat etyki zbierania surowicy. Chociaż Stowarzyszenie Branżowe zgadza się, że niektóre organizacje mają zastrzeżenia, utrzymują one, że wszystkie pobrania surowicy odbywają się pod nadzorem weterynaryjnym w zarejestrowanych rzeźniach kontrolowanych przez właściwy organ w kraju pobierania, co sprawia, że taka kwestia jest niezwykle mało prawdopodobna.
Stosowanie serum
Płodowa surowica bydlęca jest dostępna w handlu od wielu producentów, a ponieważ komórki hodowane in vitro są bardzo wrażliwe, klienci zwykle testują określone partie, aby sprawdzić, czy nadają się do określonego typu komórek. Zmieniając partię na partię, zwykle dostosowuje się komórki do nowej partii materiału, na przykład mieszając 50% starej surowicy z 50% nowej surowicy i pozwalając komórkom na aklimatyzację do nowego materiału.
Surowicę przechowuje się w stanie zamrożonym, aby zachować stabilność składników, takich jak czynniki wzrostu. Po rozmrożeniu surowicy może pojawić się osad. Jest to normalne zjawisko, które w żaden sposób nie wpływa na jakość serum. Osad można usunąć, przenosząc surowicę do sterylnych probówek i wirując przez 5 minut przy 400 × g. W celu ograniczenia ilości opadów zaleca się rozmrażanie serum w lodówce w temperaturze 2-8˚C. Podczas tego procesu serum należy regularnie mieszać. Należy unikać powtarzających się cykli zamrażania/rozmrażania, a przed zamrożeniem zaleca się dozowanie surowicy do jednorazowych porcji.
Historia źródła
Surowica produkowana do użytku w przemyśle biotechnologicznym i sektorach badawczych podlega ścisłym regulacjom. Gromadzenie i przemieszczanie wszystkich produktów pochodzenia zwierzęcego na całym świecie podlega ścisłej kontroli. Kontrola weterynaryjna produktów pochodzenia zwierzęcego jest w dużej mierze zgodna z przepisami ustanowionymi przez UE (DG SANCO) i USA (USDA). Obecne przepisy regulujące przywóz produktów ubocznych pochodzenia zwierzęcego do UE są objęte rozporządzeniem (UE) nr 1069/2009 i dokumentem wykonawczym rozporządzenia (UE) nr 142/2011.
FBS to produkt zbierany na całym świecie, z głównymi kolekcjami skupionymi w Stanach Zjednoczonych, Australii, Nowej Zelandii, Kanadzie, Ameryce Środkowej, Ameryce Południowej i Europie.
Globalna sprzedaż
Sprzedaż FBS w 2008 roku oszacowano na 700 000 litrów na całym świecie.
Kolekcjonerzy, producenci i użytkownicy końcowi FBS na całym świecie są członkami ISIA, Międzynarodowego Stowarzyszenia Przemysłu Serum. Firmy członkowskie są wymienione na stronie internetowej ISIA. Pełne dane kontaktowe są dostępne za pośrednictwem tego portalu, a ISIA jest w stanie odpowiedzieć na wszelkie pytania dotyczące gromadzenia i wykorzystywania tego ważnego zasobu.
Międzynarodowe Stowarzyszenie Przemysłu Surowic zostało utworzone w czerwcu 2006 roku w celu samoregulacji wcześniej niestandaryzowanej branży. Misja ISIA stwierdza: „ISIA ustanawia, promuje i zapewnia zgodność z bezkompromisowymi standardami doskonałości i etyki w praktykach biznesowych światowego przemysłu dostaw surowic zwierzęcych i produktów pochodzenia zwierzęcego. Naszym głównym celem będzie bezpieczeństwo i bezpieczne stosowanie surowicy i produktów pochodzenia zwierzęcego poprzez odpowiednią identyfikowalność pochodzenia, rzetelność etykietowania oraz odpowiednią standaryzację i nadzór”. "ISIA" . Źródło 2021-12-10 .
Zobacz też
- Lizat ludzkich płytek krwi (HPL) jako alternatywa dla FBS
- Medium zdefiniowane chemicznie
