Trizol
TRIzol jest szeroko stosowanym roztworem chemicznym stosowanym do ekstrakcji DNA , RNA i białek z komórek. Rozwiązanie zostało początkowo zastosowane i opublikowane przez Piotra Chomczyńskiego i Nicolettę Sacchi w 1987 roku.
TRIzol to marka tiocyjanianu guanidyny z części Ambion firmy Life Technologies , a Tri-Reagent to marka firmy MRC, której założycielem jest Chomczyński.
Zastosowania w ekstrakcji
Prawidłowa nazwa metody to ekstrakcja tiocyjanianem guanidyny-fenolu-chloroformem . Zastosowanie TRIzolu może skutkować wydajnością DNA porównywalną z innymi metodami ekstrakcji i prowadzi do >50% większej wydajności RNA. Alternatywną metodą ekstrakcji RNA jest ekstrakcja fenolem i strącanie TCA/acetonem. W przypadku stosowania odczynnika TRI nowej generacji należy zamienić chloroform na 1-bromo-3-chloropropan.
DNA i RNA z odczynników TRIzol i TRI można również ekstrahować za pomocą zestawu Direct-zol Miniprep firmy Zymo Research. Ta metoda całkowicie eliminuje użycie chloroformu i 1-bromo-3-chloropropanu, pomijając etapy rozdzielania faz i wytrącania.
TRIzol jest wrażliwy na światło i często jest przechowywany w ciemnym, szklanym pojemniku pokrytym folią. Jest przechowywany w temperaturze pokojowej.
W użyciu przypomina syrop na kaszel, jasnoróżowy. Zapach fenolu jest niezwykle silny. TRIzol działa poprzez utrzymywanie integralności RNA podczas homogenizacji tkanek, jednocześnie niszcząc i rozkładając komórki i ich składniki.
Zagrożenia
Należy zachować czujność podczas stosowania TRIzolu (ze względu na zawartość fenolu i chloroformu ).
TRIzol jest oznaczony jako ostra toksyczność doustna, skórna i inhalacyjna, oprócz działania żrącego/podrażniającego skórę w MDS producenta.
Narażenie na TRIzol może stanowić poważne zagrożenie dla zdrowia. Narażenie może prowadzić do poważnych oparzeń chemicznych, trwałych blizn i niewydolności nerek.
Eksperymenty należy przeprowadzać pod kapturem chemicznym, w fartuchu laboratoryjnym, rękawicach nitrylowych i plastikowym fartuchu.
Linki zewnętrzne