Fadebas
Phadebas jest syntetycznym substratem biochemicznym służącym zarówno do jakościowej, jak i ilościowej oceny enzymu α-amylazy . Jego aktywnym składnikiem jest DSM-P, mikrosfery, w których chemicznie związany jest niebieski barwnik. Kiedy substrat jest trawiony przez enzym amylazę w roztworze, uwalnia ten niebieski barwnik z szybkością proporcjonalną do ilości obecnego enzymu. Jest używany w wielu zastosowaniach, od testów kontroli jakości żywności i napojów po wykrywanie plam ze śliny w badaniach kryminalistycznych.
Historia
„Phadebas Amylase Test” (PAT) był pierwszym produktem opracowanym przez Pharmacia Diagnostics i wprowadzonym na rynek w 1970 roku. Nazwa Phadebas jest skrótem od Pharmacia Diagnostics Biologically Active Substances. [ potrzebne źródło ] W latach 70-tych PAT był używany w szpitalach na całym świecie jako test diagnostyczny in vitro ostrego zapalenia trzustki, ale jego zastosowanie zostało później prześcignięte przez systemy automatycznej analizy. [ potrzebne źródło ] PAT nie jest już sprzedawany na rynku IVD i nie utrzymuje już swojego certyfikatu WE. [ potrzebne źródło ] Mimo że pierwotne zastosowanie zniknęło, produkt jest nadal używany jako środek barwiący w niektórych testach klinicznych. Phadebas nie odgrywa aktywnej roli w późniejszej diagnozie w tych testach. [ potrzebne źródło ] Półręczna metoda Phadebas sprawdziła się w innych zastosowaniach poza rynkiem IVD. [ potrzebne źródło ] Metoda została przyjęta przez laboratoria kryminalistyczne oraz przemysł spożywczy i chemiczny. W 2005 roku firma została przejęta przez Magle Life Sciences, aw 2007 roku przez Phadebas Forensic został wprowadzony jako pierwsza dywersyfikacja w ramach rodziny produktów. [ potrzebne źródło ] Trzy lata później wprowadzono Phadebas Honey Diastase Test, w wyniku czego w portfolio Phadebas znalazło się łącznie osiem produktów. [ potrzebne źródło ]
Aplikacje
Phadebas jest używany w szerokim zakresie zastosowań, od testów kontroli jakości żywności i napojów po wykrywanie śladów śliny w badaniach kryminalistycznych .
Badania i jakość
PAT służy do dokładnego oznaczania α-amylazy w wielu różnych zastosowaniach przemysłowych i akademickich, np.;
- α-amylaza z detergentów
- Badania i rozwój biotechnologii (np. wydalanie amylazy przez bakterie)
- Zastosowania stomatologiczne
- Odczynnik do diagnostyki klinicznej zapalenia trzustki
- Chemikalia specjalistyczne
Kryminalni
Test Phadebas Forensic Press służy jako wstępny test na obecność śliny . Phadebas może być użyty do znalezienia śliny jako źródła DNA lub do zidentyfikowania pochodzenia plamy. Badanie przeprowadza się poprzez przyłożenie do próbki papieru związanego z podłożem Phadebas i przyłożenie nacisku. Jest to bardziej czuła i selektywna metoda identyfikacji plam ze śliny niż alternatywne źródła światła, ponieważ plamy te nie wykazują silnej fluorescencji i mogą być mylone z innymi płynami biologicznymi, takimi jak nasienie. Test można uznać za selektywny dla śliny, ponieważ aktywność α-amylazy w ślinie jest zwykle o kilka rzędów wielkości większa niż w innych płynach ustrojowych. Badanie wykazało, że nawet 40% plam ze śliny na ubraniach pozostaje niewykrytych przy użyciu alternatywnych źródeł światła. Test jest w stanie zlokalizować osady śliny w niewielkiej zależności od porowatości podłoża.
Specyficzność dla śliny
Istnieją inne substancje ustrojowe, które mogą dać pozytywny wynik testu alfa-amylazy przy użyciu testu Phadebas Forensic Press. Niektóre przykłady obejmują kał, nasienie, mocz i łzy. Chociaż istnieje możliwość fałszywie dodatnich wyników z innych źródeł amylazy, instrukcje użytkowania opublikowane przez Phadebas Forensic stwierdzają, że żaden inny istotny płyn biologiczny (z wyjątkiem kału) nie zareaguje w ciągu 10 minut od wykonania testu. Wykazano również, że niektóre nierozcieńczone detergenty mogą powodować dodatnią reakcję w teście z amylazą Phadebas. Test nie jest specyficzny dla człowieka; jest wrażliwa na ślinę innych gatunków, amylazę z drobnoustrojów np Baccilus i ekstrakty z niektórych roślin, w tym jabłka i kapusty.
Pokarmowy
Test służy do oznaczania α-amylazy w wielu różnych zastosowaniach spożywczych, na przykład w żywności i napojach:
Zgodnie z unijną dyrektywą miodową aktywność diastazy jest kryterium składu, które należy określić dla miodów przeznaczonych do spożycia przez ludzi. Oficjalnymi metodami analitycznymi służącymi do oznaczania aktywności diastazy w miodzie są testy Schade i Phadebas, zalecane przez International Honey Commission. Ponieważ metoda ta opiera się na ustalonych równaniach zamiast krzywej standardowej , opracowano nowy test diastazy miodu Phadebas, aby zapewnić stabilne wyniki niezależnie od partii.