Francuska prasa ciśnieniowa
Francuska prasa ciśnieniowa lub prasa francuska to urządzenie używane w eksperymentach biologicznych do rozrywania błony komórkowej komórek poprzez przepuszczanie ich przez wąski zawór pod wysokim ciśnieniem . Prasa francuska może być również używana do dezintegracji chloroplastów, homogenatów tkanek zwierzęcych i innych cząstek biologicznych. Jest w stanie rozerwać ściany komórkowe, pozostawiając nienaruszone jądro komórkowe. Francuska prasa została wynaleziona przez Charlesa Stacy'ego Frencha z Carnegie Institution of Washington . Prasa korzysta z zewnętrznego hydrauliczna do napędzania tłoka w większym cylindrze zawierającym próbkę cieczy. Próbka pod wysokim ciśnieniem jest następnie przeciskana przez zawór iglicowy . Gdy próbka przechodzi przez zawór, płyn doświadcza naprężeń ścinających i dekompresji , powodując rozerwanie komórek. Główne elementy francuskiej prasy są wykonane ze stali nierdzewnej, aby zapobiec zanieczyszczeniu próbki.
Prasa francuska jest powszechnie używana do rozbijania sprężystej błony plazmatycznej i ścian komórkowych bakterii i innych mikroorganizmów w celu izolacji białek i innych składników komórkowych. Rozerwanie komórek w prasie francuskiej generuje pęcherzyki błonowe „na lewą stronę na zewnątrz”, które są wymagane w wielu testach biochemicznych in vitro . Komórka jest zazwyczaj schładzana przez noc przed użyciem, aby zachować aktywność enzymatyczną.
Wady prasy obejmują to, że nie nadaje się ona dobrze do obróbki dużych objętości próbek i jest nieco trudna w obsłudze ze względu na duży ciężar zespołu (około 14 kg). Inną wadą jest to, że objętość komórki wejściowej musi być wolna od dużych skupisk komórek, co wymaga etapu wstępnego przetwarzania (zwykle przez sonikację). Jeśli grudki komórek nie zostaną usunięte przed przetwarzaniem, nastąpi zatkanie zaworu, a urządzenie musi zostać dokładnie wyczyszczone przed kontynuowaniem przetwarzania. W rezultacie wiele laboratoriów zajmujących się oczyszczaniem białek stwierdza, że użycie lizozymu i sonikacji jest wystarczające do rutynowej ekspresji białek bakteryjnych.
Inne technologie, takie jak sonikacja i młyny kulowe , są dostępne dla wielu tych samych celów i mają swoje zalety i wady. Na przykład sonikacja może generować duże siły ścinające, które rozbijają DNA komórkowe na małe fragmenty. W prasie francuskiej siłę ścinającą można ostrożnie modulować, regulując ciśnienie tłoka. Prasa zapewnia pojedyncze przejście przez punkt maksymalnej siły ścinającej, ograniczając uszkodzenia delikatnych struktur biologicznych w wyniku powtarzającego się ścinania, jak ma to miejsce w przypadku innych metod niszczenia.