HT-29
HT-29 to ludzka linia komórkowa raka okrężnicy szeroko stosowana w badaniach biologicznych i nowotworowych.
Charakterystyka
Komórki HT-29, pierwotnie wyprowadzone w 1964 roku przez Jorgena Fogha z 44-letniej kobiety rasy kaukaskiej, tworzą zwartą pojedynczą warstwę, wykazując jednocześnie podobieństwo do enterocytów z jelita cienkiego . Komórki HT-29 wytwarzają nadprodukcję p53 , ale mają mutację w genie p53 w pozycji 273, w wyniku czego histydyna zastępuje argininę . Komórki namnażają się szybko w pożywce zawierającej suraminę , z odpowiednią wysoką ekspresją onkogenu c-myc . Jednak c-myc jest rozregulowany, ale może mieć związek z zapotrzebowaniem na czynnik wzrostu komórek HT-29.
Aplikacje
W badaniach przedklinicznych komórki HT-29 badano pod kątem ich zdolności do różnicowania , a tym samym symulowania prawdziwej tkanki okrężnicy in vitro , cechy, która uczyniła HT-29 użytecznym w badaniach nad komórkami nabłonkowymi . Komórki można również testować in vivo za pomocą ksenoprzeszczepów na gryzoniach. Komórki HT-29 ostatecznie różnicują się w enterocyty z zastąpieniem glukozy galaktozą w hodowli komórkowej i dodatkiem maślanu lub kwasy, ścieżki różnicowania można dokładnie zbadać wraz z ich zależnością od warunków otoczenia. W związku z tym badania komórek HT-29 wykazały indukowane różnicowanie w wyniku forskoliny , kolchicyny , nocodazolu i taksolu , przy czym różnicowanie za pośrednictwem galaktozy powoduje również wzmocnienie połączeń przylegających .
Kultywowanie
Chociaż komórki HT-29 mogą namnażać się w hodowli komórkowej pozbawionej czynników wzrostu z czasem podwojenia wynoszącym około 4 dni, czas podwojenia można skrócić do jednego dnia, dodając płodową surowicę bydlęcą . Komórki zużywają dużo glukozy iw standardowej pożywce zawierającej 25 mM glukozę i 10% surowicę pozostają niezróżnicowane.
Linki zewnętrzne