Kompleks Tim9-Tim10
Tim9 i Tim10 tworzą grupę niezbędnych małych białek Tim, które pomagają w transporcie prekursorów hydrofobowych przez przestrzeń międzybłonową w komórkach ssaków. Zarówno Tim9, jak i Tim10 tworzą heksamer, kompleks Tim9-Tim10, który po połączeniu działa jako opiekun wspomagający translokację prebiałek z zewnętrznej błony mitochondrialnej do translokazy błony wewnętrznej . Funkcjonalny kompleks Tim9-Tim10 nie tylko kieruje prebiałka do wewnętrznej błony mitochondrialnej w celu interakcji z kompleksem TIM22, ale także prowadzi białka prekursorowe beczki β do maszynerii sortującej i montażowej (SAM) błony zewnętrznej.
Struktura kompleksu Tim9-Tim10
Kompleks Tim9-Tim10 składa się z trzech cząsteczek Tim9 i trzech cząsteczek Tim10. Każda podjednostka Tim9 i Tim10 składa się z 80-110 reszt aminokwasowych z czterema konserwatywnymi cysteiny , które tworzą dwa wewnątrzcząsteczkowe wiązania dwusiarczkowe . Każda podjednostka fałduje się w strukturę helisa-pętla-helisa, przy czym każda pętla tworzy kształt pierścienia, który obejmuje górną powierzchnię kompleksu. Struktura kompleksu Tim9-Tim10 ma postać śmigła α, z dwoma spiralnymi łopatami rozchodzącymi się promieniście z wąskiego centralnego pora.
Biogeneza małych Timów
Małe białka Tim są syntetyzowane bez rozszczepialnej presekwencji, ale zamiast tego zawierają informacje o wewnętrznym kierowaniu i muszą zostać zaimportowane do przestrzeni międzybłonowej. Uważa się, że maszyny do importu i montażu przestrzeni międzybłonowej (MIA) pośredniczą w transporcie małych prekursorów Tim do podprzedziału przestrzeni międzybłonowej. MIA składa się z dwóch głównych niezbędnych białek bogatych w cysteinę; Mia40 i Erv1. Mia40 jest również określany jako Tim40 w drożdżach, a niedobór Mia40 wpływa na import małych Timów. Mia40 jest zakotwiczona w wewnętrznej błonie mitochondrialnej przez N-końcowy segment hydrofobowy, odsłaniając dużą domenę w przestrzeni międzybłonowej. Zawiera 6 konserwowanych reszt cysteiny, które umożliwiają wiązanie nadchodzących białek prekursorowych Tim. Po imporcie małych białek Tim do przestrzeni międzybłonowej Mia40 oddziałuje z małymi białkami Tim poprzez wiązania dwusiarczkowe. Po izomeryzacji mostka dwusiarczkowego polipeptyd jest uwalniany. Mia40, która jest teraz w stanie zredukowanym, jest następnie utleniana przez Erv1. To utlenianie krok jest niezbędny dla ułatwienia dalszych rund importu białek prekursorowych. Bez aktywności Erv1 zredukowana Mia40 gromadzi się i jest w nieaktywnej konformacji. Interakcja między przychodzącymi białkami prekursorowymi, Mia40 i Erv1, jest utrzymywana w wyniku przepływu elektronów, które są przenoszone z przychodzącego białka do Mia40 i od zredukowanego Mia40 do utlenionego Erv1. Prekursory są następnie uwalniane w stanie utlenionym i tworzą mostki dwusiarczkowe, co uniemożliwia ich wydostanie się z przestrzeni międzybłonowej. Małe białka Tim są następnie utrzymywane w aktywnej konformacji w przestrzeni międzybłonowej przez Hot13 (pomocnika Timsa). Możliwe, że Hot13 może mieć działanie redukujące na małe białka Tim, ponieważ równoważą one szkodliwe działanie, jakie wykazują czynniki utleniające.