Efekt haka
Efekt haka odnosi się do zjawiska prozone, znanego również jako nadmiar przeciwciał lub zjawiska Postzone, znanego również jako nadmiar antygenu. Jest to zjawisko immunologiczne , w wyniku którego skuteczność przeciwciał w tworzeniu kompleksów immunologicznych może być osłabiona, gdy stężenie przeciwciała lub antygenu jest bardzo wysokie. Tworzenie się kompleksów immunologicznych przestaje rosnąć przy wyższych stężeniach, a następnie zmniejsza się przy ekstremalnie wysokich stężeniach, tworząc haczyk kształt na wykresie pomiarów. Ważnym praktycznym znaczeniem tego zjawiska jest rodzaj interferencji, który jest plagą niektórych immunologicznych i testów nefelometrycznych , co skutkuje fałszywymi negatywami lub niedokładnie niskimi wynikami. Inne powszechne formy interferencji obejmują interferencję przeciwciał, reaktywność krzyżową i interferencję sygnału. Zjawisko to jest spowodowane bardzo wysokimi stężeniami określonego analitu lub przeciwciała i jest najbardziej rozpowszechnione w jednoetapowych (kanapkowych) testach immunologicznych .
Mechanizm i znaczenie in vitro
Prozone - nadmiar przeciwciał
W teście aglutynacji surowica osoby (zawierająca przeciwciała ) jest dodawana do probówki zawierającej określony antygen . Jeśli przeciwciała wchodzą w interakcję z antygenem, tworząc kompleksy immunologiczne , zwane aglutynacją, wówczas wynik testu jest interpretowany jako pozytywny. Jeśli jednak obecnych jest zbyt wiele przeciwciał, które mogą wiązać się z antygenem, wówczas miejsca antygenowe są pokryte przeciwciałami, a niewiele lub żadne przeciwciała skierowane przeciwko patogenowi są w stanie związać więcej niż jedną cząstkę antygenową. Ponieważ przeciwciała nie tworzą mostków między antygenami, nie dochodzi do aglutynacji. Ponieważ nie dochodzi do aglutynacji, wynik testu jest interpretowany jako ujemny. W tym przypadku wynik jest fałszywie ujemny. Zakres stosunkowo wysokich stężeń przeciwciał, w których nie zachodzi reakcja, nazywa się prozon .
Strefa pocztowa - nadmiar antygenów
Efekt ten może również wystąpić z powodu nadmiaru antygenu, gdy zarówno przeciwciała wychwytujące, jak i wykrywające zostaną nasycone przez wysokie stężenie analitu. W tym przypadku przeciwciało wychwytujące, antygen i przeciwciało wykrywające nie mogą utworzyć kanapki. W tym przypadku wolny antygen konkuruje z wychwyconym antygenem o wiązanie przeciwciała wykrywającego. Sekwencyjne dodawanie antygenu i przeciwciała w połączeniu z rygorystycznym przemywaniem może zapobiec efektowi, podobnie jak zwiększenie względnego stężenia przeciwciała względem antygenu, pośrednicząc w ten sposób w efekcie. [ potrzebne źródło ]
Przykłady obejmują wysoki poziom przeciwciał przeciwko syfilisowi u pacjentów z HIV lub wysoki poziom antygenu kryptokokowego prowadzący do fałszywie ujemnych wyników testów w nierozcieńczonych próbkach. Zjawisko to obserwuje się również w testach serologicznych na brucelozę. [ potrzebne źródło ] Może to być widoczne w reakcjach wytrącania. Przeciwciało, które nie reaguje, jest znane jako przeciwciało blokujące i zapobiega wiązaniu się precypitującego przeciwciała z antygenami. W ten sposób nie zachodzi właściwa reakcja wytrącania. Jednak gdy surowica jest rozcieńczona, przeciwciało blokujące również jest, a jego stężenie spada na tyle, aby nastąpiła właściwa reakcja wytrącania.
Obserwacje in vivo
Lewis Thomas opisał w swoich wspomnieniach eksperyment fizjologiczny z 1941 r., w którym zaobserwował efekt prozone in vivo : odporność królików na meningokoki , która była silna, nieoczekiwanie spadła, gdy zastosowano immunizację w celu wywołania zwiększonej odpowiedzi przeciwciał. Innymi słowy, zmuszanie ciał królików do wytwarzania większej ilości przeciwciał przeciwko tej bakterii miało efekt przeciwny do zamierzonego, polegający na zmniejszeniu ich odporności na nią. Z punktu widzenia zbyt uproszczonego pojęcia relacji przeciwciało/antygen wydaje się to paradoksalne , chociaż jest to oczywiście logiczne z punktu widzenia należycie poinformowanego przez współczesną biologię molekularną. Thomas był zainteresowany dalszymi badaniami fizjologicznymi i pozostał nim przez następne dziesięciolecia, ale jego kariera poprowadziła go w innych kierunkach i nie był świadomy, że ktoś go prowadził do czasu jego wspomnień. Jednym z rodzajów istotności, które postawił hipotezę dla tej przeciwciał blokujących in vivo , była siła napędowa ludzkiej podatności na pewne choroby zakaźne. Od dziesięcioleci koncepcja ta ma również znaczenie kliniczne w immunoterapii alergenowej , gdzie przeciwciała blokujące mogą interferować z innymi przeciwciałami biorącymi udział w nadwrażliwości, a tym samym poprawić leczenie alergii.