Komórki KBM-7
Komórki KBM-7 to linia komórek przewlekłej białaczki szpikowej (CML) wykorzystywana w badaniach biomedycznych. Jak wszystkie linie komórek nowotworowych , jest nieśmiertelna i może dzielić się w nieskończoność. Unikalnym aspektem linii komórkowej KBM-7 jest to, że jest ona prawie haploidalna , co oznacza, że zawiera tylko jedną kopię większości swoich chromosomów. Ludzkie chromosomy są zazwyczaj diploidalne, co oznacza, że istnieją dwie kopie każdego chromosomu.
Pochodzenie
Komórki KBM-7 pochodziły od 39-letniego mężczyzny z przewlekłą białaczką szpikową w kryzysie blastycznym. Oryginalna linia komórkowa zawierała zarówno klony blisko haploidalne , jak i hiperdiploidalne. Późniejsze subklonowanie dało czystą, prawie haploidalną linię komórkową. Analiza genomu wykazała, że oprócz disomicznego chromosomu 8, fragment chromosomu 15 o wielkości 30 megazasad jest obecny w dwóch kopiach. Podobnie jak inne linie komórkowe CML (np. K562 ) komórki KBM-7 są dodatnie pod względem chromosomu Philadelphia niosącego onkogenną fuzję BCR-ABL. Komórki KBM-7 zostały przeprogramowane , aby uzyskać HAP1 linia komórkowa, która jest również monosomowa pod względem chromosomu 8.
Uprawa i zastosowania
Komórki KBM-7 rosną w zawiesinie i są utrzymywane w pożywce Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) uzupełnionej 10% płodową surowicą bydlęcą . Dzielą się mniej więcej co 24 godziny.
KBM-7 znalazł zastosowanie w różnych badaniach genomicznych; linia komórkowa została zbadana w z wyciszaniem genów , została przeprogramowana, aby stała się linią komórek macierzystych i posłużyła jako model testowy dla nowych kandydatów na leki.
Znaczenie
Jedna metoda badania funkcji genów obejmuje „wybijanie” genu poprzez indukowanie mutacji. Powoduje to, że powstały produkt genu jest niefunkcjonalny, a naukowcy mogą następnie zobaczyć, jak wpływa to na funkcję komórki jako całości. Wiele procedur edycji genów ma bardzo niską wydajność i często obie kopie chromosomów ssaków muszą zostać wyeliminowane, aby zobaczyć efekt fenotypowy. Posiadanie prawie haploidalnej linii komórkowej, takiej jak KBM-7, znacznie zwiększa efektywność tych badań, ponieważ istnieje tylko jeden gen, który musi zostać wyeliminowany.