Zbiór dowodów entomologicznych
Zbieranie dowodów entomologicznych to proces zbierania dowodów na podstawie śladów owadów wykorzystywanych w dochodzeniach kryminalnych . Jeśli dowody nie są starannie przechowywane na miejscu zbrodni po śmierci, entomolog może mieć trudności lub uniemożliwić dokładną identyfikację okazów, jeśli na przykład wszystkie cechy morfologiczne nie zostaną zachowane.
Zbieranie materiałów
Jedną z najcenniejszych rzeczy entomologa sądowego jest jego zestaw do zbierania. Dostępne są na rynku zestawy do zbierania dowodów na owady [1] , ale można dostosować własne do wymagań geograficznych i budżetowych. Poniżej znajduje się lista niezbędnych narzędzi.
- Siatki na owady z powietrza lub zamiatania: Siatki mogą mieć od 15 do 36 cali
- Pułapki samoprzylepne: (patrz rys. 1)
- Piórkowe lub lekkie kleszcze dotykowe
- Fiolki do zbierania: zakrętki z wkładkami z neoprenu o pojemności 4 dram, zabijające słoiki, które są słoikami o grubości ½ cala z gipsu do wchłaniania octanu etylu
- Plastikowe pojemniki na „jogurt” lub „przynętę”: używane do zbierania i transportu larw
- Folia aluminiowa: Używana do budowy woreczka, który pomieści żywe larwy i źródło ich pożywienia podczas transportu
- Wermikulit : Używany do napełniania dna pojemników na larwy
- Plastikowe pojemniki na próbki o wielkości 4-8 uncji
- nieprzylepne i mocno klejące stosowane do etykietowania i umieszczania wewnątrz i na zewnątrz pojemników zbiorczych
- ołówek nr 2
- Mała kielnia ręczna lub łopata ogrodowa: używana do pobierania próbek gleby i kopania w poszukiwaniu migrujących larw lub poczwarek w scenach śmierci na świeżym powietrzu
- Termometry: najlepiej cyfrowe, ale z tarczą, rtęciowe lub alkoholowe są w porządku
- Lustrzanka 35 mm, obiektyw i lampa błyskowa: Używane do makrofotografii owadów w miejscu zdarzenia. Standardowego obiektywu 35 mm należy również używać do ogólnych zdjęć scenicznych.
- Linijka lub inne urządzenie pomiarowe: do pokazania skali na zdjęciach
- Rękawiczki jednorazowe
- Środki chemiczne do konserwacji i zbierania: W szczególności alkohol etylowy , octan etylu i KAA
- Ręczniki papierowe: do stosowania w słoikach na mięso i do czyszczenia przyborów kuchennych
- Termos z wrzącą wodą: Służy do gotowania larw
- Przesiewacze: używane do przetwarzania próbek gleby w poszukiwaniu owadów i artefaktów owadów
- Formularz entomologicznej sceny śmierci [2]
- Kontenery transportowe: najlepsze są pojemniki styropianowe z pokrywkami, ponieważ zapewniają dobrą izolację przed ekstremalnymi temperaturami, ale szeroko stosowane są pudła z tektury falistej
- Ta lista została zaadaptowana ze strony internetowej dr JH Byrda dotyczącej sprzętu i materiałów do zbierania entomologii.
Zbieranie okazów
Aby dowody entomologiczne miały wartość dla badania miejsca śmierci, ważne jest, aby każdy szczegół został odnotowany i zachowany. Podczas zbierania owadów należy zachować dużą ostrożność, aby zapewnić zachowanie nienaruszonych cech morfologicznych w celu pozytywnej identyfikacji gatunku. Ważna jest również szczegółowa obserwacja otoczenia ciała, aby można było wyciągać wnioski o wydarzeniach poprzedzających śmierć, łącząc stadia znalezionych owadów z ich dostępem do ciała. Osiąga się to za pomocą odpowiednich narzędzi i papierkowej roboty w celu zebrania i zarejestrowania wszystkich dostępnych dowodów. W większości przypadków ważne jest pobieranie próbek do badania sukcesji owadów trzy razy dziennie przez około miesiąc. Przy określaniu okresu sekcji zwłok należy również wziąć pod uwagę temperaturę otoczenia i temperaturę ciała.
Zbieranie owadów na ciele
Należy zachować dużą ostrożność podczas usuwania owadów z ciała przed usunięciem go z miejsca zdarzenia. Podczas tej zbiórki nie wolno naruszać ciała, odzieży i najbliższego otoczenia. Owady można usuwać tylko z powierzchni ciała i należy zachować szczególną ostrożność przy użyciu kleszczy i innych narzędzi, aby zapobiec artefaktom pośmiertnym. Jakiekolwiek uszkodzenie ciała lub integralności miejsca zdarzenia może stworzyć mylący dowód, który może zaszkodzić dochodzeniu. Ponadto miejsce na ciele, z którego pobrano każdą próbkę, powinno być wyraźnie zaznaczone na etykiecie próbki.
Zbieranie jaj
Jaja są niezwykle małe i delikatne, dlatego należy zachować szczególną ostrożność podczas ich zbierania. Jaja są zwykle składane w kępach lub masach i znajdują się w każdym otworze, niezależnie od tego, czy jest to naturalny otwór, czy rana. Najbezpieczniejszym sposobem usunięcia jaj jest użycie małego pędzla zamoczonego w wodzie, tak aby jajka przywarły do włosia. Można użyć kleszczyków, ale często mogą one uszkodzić jaja. Połowę jaj należy umieścić w środku konserwującym, a drugą połowę trzymać przy życiu, aby mogła się odchować. Ponieważ często trudno jest zidentyfikować jaja owadów, odchów jaj do dorosłości zapewnia pozytywną identyfikację. Aby zapobiec odwodnieniu jaj, ważne jest umieszczenie wilgotnej chusteczki lub innego podłoża w fiolce do pobierania. Ważne jest również, aby upewnić się, że jaja mają powietrze, umieszczenie ręcznika papierowego na wierzchu za pomocą gumki zapewnia dużą wentylację. Nowo pojawiające się robaki są bardzo małe, więc fiolka musi pozostać w pozycji pionowej, aby zapobiec ucieczce.
Zbieranie robaków i larw
Ważne jest, aby zebrać wszystkie różne rozmiary robaków znalezionych w każdej masie robaków. Większe robaki zwykle reprezentują pierwsze muchy, które pojawiają się na ciele, ale różnej wielkości robaki mogą również reprezentować różne gatunki. Jak wspomniano wcześniej, ważne jest, aby zwrócić uwagę na lokalizację i temperaturę masy robaków, ponieważ wpłynie to na liczbę stopniodni potrzebnych do rozwoju muchy. Ważne jest, aby zachować okaz, aby zobaczyć jego dokładny stan rozwoju dla późniejszych dowodów. Można to zrobić, gotując robaki, a następnie umieszczając je w 70% alkoholu lub 50% alkoholu izopropylowym . W pojemniku do hodowli robaków należy przechowywać około 100 żywych okazów każdej wielkości lub rozpoznawalnych gatunków. Ważne jest, aby trzymać gatunki i rozmiary osobno, aby zapobiec kanibalizmowi . Ponieważ stadia 1 i 2 mogą być delikatne, konieczne może być usunięcie ich szczoteczką w taki sam sposób, jak omówiono z jajami. Silniejsze larwy w trzecim stadium rozwojowym można usunąć kleszczami (Anderson). Inną techniką, którą można zastosować do usuwania robaków, jest zbieranie ich plastikową łyżką.
Poczwarka
Pupa można czasami znaleźć na ubraniu ciała i można ją usunąć za pomocą kleszczy lub palców. Ponieważ poczwarki nie rosną, nie jest konieczne ich zachowanie. Jeśli okaz zostanie znaleziony w bladym kolorze, właśnie wszedł w okres przepoczwarzenia. Taki okaz należy przechowywać osobno, ponieważ jego dokładny wiek można określić z dokładnością do kilku godzin. Wszystkie owady znalezione na ciele należy umieścić w słoikach do zabijania i odpowiednio oznakować. W większości dorosłe muchy są ważne tylko dla wskazania, jakie gatunki much mogą rozwinąć się na zwłokach. Jeśli jednak zostanie znaleziony dorosły osobnik z pogniecionymi skrzydłami, należy go tak oznaczyć, ponieważ wskazuje to, że mógł on właśnie wyłonić się z osłonki źrenicy. Wskazuje to, że ze zwłok rozwinęło się co najmniej jedno pokolenie much. Dodatkowo pułapki lepowe można wykorzystać (umieszczając je wokół ciała) do zbierania poruszających się po ciele owadów (głównie much).
Całą pułapkę lepową zwykle obserwuje się pod mikroskopem w celu identyfikacji gatunku owadów znajdujących się w pułapce, ponieważ oddzielenie ich od pułapki jest bardzo trudne. Wiele innych owadów poza muchami jest przyciąganych do sceny ze względu na zapach , podczas gdy inne są obecne przypadkowo. Dlatego owady są zbierane selektywnie. Innym owadem, który jest ważny z punktu widzenia medycyny sądowej, jest chrząszcz, o którym wiadomo, że dostarcza wskazówek co do stopnia narażenia ciała. Rękawiczki są zalecane do chwytania dorosłych chrząszczy i larw, ponieważ ułatwia to ręczne przenoszenie zarówno dorosłego chrząszcza, jak i larw do odpowiedniego pojemnika bez obawy o zmiażdżenie ich stwardniałego egzoszkieletu.
Techniki pobierania próbek przed usunięciem ciała
Pułapki na muchy dla szczeniąt
Technika ta została opracowana w Knoxville w stanie Tennessee w 1989 roku iw badaniu pilotażowym okazała się bardziej skuteczna niż użycie siatki powietrznej. Pułapki są zbudowane z wyprodukowanych pułapek lepowych o wymiarach około 9 cali (230 mm) na 10 cali (250 mm) w kształcie odwróconej litery „V” lub małego namiotu, z lepkim materiałem na zewnątrz (patrz rys. 1). Te pułapki mają zazwyczaj cztery spinacze do bielizny przypięte do dolnych rogów, aby zapewnić prześwit. Pułapki są umieszczane w różnych odległościach od ciała, od 1 stopy (0,30 m) do 12 stóp (3,7 m), jedną stroną skierowaną w stronę ciała. Boki pułapek powinny być ustawione pod kątem 60 stopni. Po zakończeniu zbierania pułapki lepowej należy oznaczyć zarówno czas jej wystawienia, jak i czas jej podniesienia. W laboratorium owady można pojedynczo usuwać i przed konserwacją spłukać rozcieńczalnikiem do farb lub ksylenem.
Zamaszysty
Ogólnie owady związane z padliną są silnymi i szybkimi lotnikami, ale przy wprawie można je złapać za pomocą siatki powietrznej. Technika zamiatania polega na wykonywaniu szybkich ruchów w przód iw tył po ciele. Za każdym razem, gdy zmienia się kierunek, wylot sieci musi zostać odwrócony o 180 stopni, aby zachować jedno wejście. Szybkość jest ważna nie tylko przy chwytaniu owadów, ale także przy trzymaniu tych, które już zostały złapane w środku. Zwykle wystarczy 6-10 przeciągnięć, a przy ostatnim przeciągnięciu otwór siatki jest podnoszony tak, aby znajdował się poziomo na wysokości mniej więcej klatki piersiowej, a następnie obracany o 180 stopni, aby zamknąć siatkę. Tylny koniec siatki można następnie umieścić w słoiku do zabijania z zamkniętą pokrywą. Po około 2 do 5 minutach owady można zakonserwować. Procedurę tę należy powtórzyć około 3 razy, aby zapewnić dobrą próbkę owadów latających w okolicy. Należy pamiętać, że w obszarach zalesionych lub zaroślach może być konieczne użycie mocniejszej siatki, aby siatka się nie rozerwała.
Etykietowanie
Zaraz po pobraniu okazu należy go odpowiednio oznakować. Etykiety powinny zawierać wszystkie następujące numery próbek, dokładny czas, datę, numer sprawy i hrabstwo/miasto. Ważne jest, aby etykieta była umieszczona zarówno wewnątrz fiolki z próbką, jak i na zewnątrz. Należy pamiętać, że etykiety nigdy nie należy umieszczać na pokrywce, ponieważ pokrywki można łatwo zmieniać. Konieczne jest również, aby nigdy nie używać długopisu, zawsze należy używać ołówka grafitowego. Wiele stosowanych środków konserwujących może powodować spływanie atramentu, co nie tylko niszczy etykietę, ale może również uszkodzić próbkę. Podczas oznaczania próbek pobranych z ciała ważne jest, aby odnotować dokładne miejsce, z którego zostały pobrane.
Postępowanie po usunięciu ciała
Po usunięciu zwłok z miejsca śmierci należy postępować zgodnie z procedurami w celu uzyskania dokładnego czasu zgonu. Jedną z metod dokumentacji jest formularz studium przypadku miejsca śmierci. Formularz ten służy do odnotowywania stanu zwłok, jak również otoczenia miejsca znalezienia zwłok. Przed zebraniem materiału dowodowego zostaną wykonane zdjęcia w celu udokumentowania miejsca zdarzenia.
Zgodnie z procedurami ciała
Bezpośrednio po usunięciu zwłok z miejsca zdarzenia obserwuje się glebę, która znajdowała się pod zwłokami. Badanie gleby dostarczy dowodów, które pomogą w dochodzeniu. Pod ciałem mogą znajdować się chrząszcze i robaki zagrzebujące się w ziemi. Dlatego ważne jest, aby pobierać próbki gleby bezpośrednio pod ciałem, aby wydobyć te owady, które mogą być ukryte przed wzrokiem. Zbierane są owady na wszystkich etapach rozwoju. Stadia te mogą mieć postać jaj, larw (z których największe stadia rozwojowe są najważniejsze do identyfikacji) poczwarek i postaci dorosłych. Połowa tych owadów zostanie zakonserwowana, a druga połowa zostanie wyhodowana do postaci dorosłej do analizy w laboratorium. Udokumentowano informacje o innych owadach występujących na tym obszarze, o których wiadomo, że są drapieżnikami. Owady drapieżne mogą być odpowiedzialne za owady, które zwykle są obecne na ciele. Zbierane będą śmieci pod zwłokami oraz w pobliżu miejsca odnalezienia zwłok. Te próbki ściółki mogą zawierać owady zbyt małe, aby je zebrać. W celu oddzielenia owadów od ściółki stosuje się lejek Berlese/Tullgren.
Temperatura, pogoda i klimat
Temperatura, pogoda i klimat to ważne odczyty, które należy zapisać. Te odczyty pomogą w określeniu stopniodni. Rozwój owada opiera się na tych czynnikach. Istnieje kilka różnych odczytów temperatury, które są pobierane z tego obszaru. Pierwsza to temperatura powietrza na wysokości klatki piersiowej. Po drugie, rejestrowana jest temperatura między ciałem a podłożem. Kolejną temperaturą do zmierzenia jest powierzchnia gruntu bezpośrednio pod ciałem, 1-2 m od ciała, która obejmuje trzy różne źródła. Te trzy źródła znajdują się pod ściółką trawy lub ziemi, na głębokości 4 cm i 20 cm ( http://brazoria_county.com [ stały martwy link ] ). Temperatura masy larw zostanie zarejestrowana. Dane pogodowe i klimatyczne są zbierane z dwóch różnych źródeł. Pierwszym źródłem będzie sama scena śmierci. Zarejestrowane zostaną maksymalne i minimalne temperatury przez trzy do pięciu dni. Ważna jest dokładność w zbieraniu danych o pogodzie i klimacie. Warunki takie jak bezpośrednie światło słoneczne lub opady rosy mogą wpływać na dokładność zbieranych danych. Przyrządem służącym do rejestrowania wilgotności względnej jest psychrometr. Dane te zostaną następnie porównane z danymi zebranymi z drugiego źródła, którym byłaby National Weather Service (stacja NWS) lub zatwierdzona agencja. Dane wymagane ze Stacji NWS dotyczą okresu od dwóch tygodni przed przewidywanym czasem zgonu do trzech do pięciu dni po przewidywanym czasie zgonu. Wykorzystanie nagrań entomologa sądowego temperatur miejsca śmierci oraz stacji NWS łącznie zwiększy dokładność interwału sekcji zwłok .
Analiza obszaru
Wykorzystanie formularza studium przypadku miejsca śmierci pomaga w udokumentowaniu bezpośredniego obszaru, w którym znaleziono ciało. Podczas analizy terenu stosowana jest metoda koncentrycznych kręgów, aby nie przeoczyć dowodów. Podczas chodzenia w tych kręgach ważne jest, aby zauważyć duże inwazje owadów w obszarze dwudziestu stóp od miejsca, w którym znajdowało się ciało. Obszar ten może zawierać różne owady, które kiedyś były na ciele i odeszły z powodu ruchu ciała. Ślady pozostawione w ziemi przez duże masy robaków opuszczających ciało w celu przepoczwarzenia mogą zidentyfikować entomolodzy. Dzięki obecności entomologa na miejscu zdarzenia dowody takie jak ten można poprawnie zidentyfikować, zamiast śledczych, którzy niedokładnie ustalili, że ciało zostało przeciągnięte po ziemi. Formularz studium przypadku miejsca śmierci zawiera zapis, czy obszar jest wiejski , miejski czy wodny. Rejestrowanie miejsca znalezienia ciała jest również ważne, ponieważ rozkład zachodzi w różnym tempie w zależności od tego, gdzie znajdowało się ciało. Ciało w powietrzu rozkłada się szybciej niż ciało w wodzie, a ciało w wodzie rozkłada się szybciej niż ciało zakopane w ziemi. Informacje te są zbierane w celu określenia odstępu pośmiertnego.
Przykładowe przypadki
Poniższe przypadki dostarczają przykładów, w jaki sposób śledczy z miejsca zbrodni i entomolodzy sądowi wykorzystują owady podczas dochodzenia i rozwiązywania spraw.
Larwy kapitana sera na uzależnionej od heroiny
W listopadzie 1995 roku kobieta uzależniona od heroiny popełniła samobójstwo, przykładając szyję do torów kolejowych jadącego pociągu. Jej ciało znaleziono pod krzakami w pobliżu torów. Nie udało się zidentyfikować jamy brzusznej i narządów klatki piersiowej. Część rozkładającej się tkanki była nadal przyczepiona do miednicy i kończyn. Niewielka ilość włosów znajdowała się blisko czaszki szkieletu. Początkowo szacowany okres sekcji zwłok ustalono na dwa do trzech miesięcy.
Podczas sekcji zwłok zidentyfikowano masy larw piofilidów w rozkładających się szczątkach i odsłoniętych kościach. Na suchej skórze i włosach znaleziono żółte jaja. Niestety pomieszczenie hodowlane zostało zatrute podczas rozmnażania znalezionych na ciele jaj owadów. Identyfikacja musiała zostać przeprowadzona na podstawie izolowanych części ciała dorosłej muchy, później zidentyfikowanej jako Piophila casei lub bardziej znanej jako mucha serowa , która zwykle zasiedla odkryte zwłoki od trzech do sześciu miesięcy po śmierci. Ze względu na ilość jaj znalezionych na ciele wierzono, że na ciele powstało drugie pokolenie. Na podstawie rozwoju tych much obliczono okres pośmiertny i uznano, że ciało znajdowało się na miejscu przez 112 do 128 dni. Później odkryto, że kobieta była zaginiona przez cztery miesiące.
Inne chrząszcze znaleziono na ciele i włosach, ale nie miały one znaczenia diagnostycznego.
Dorosła mucha na rozłożonej głowie
W maju 1996 roku policję zawiadomił mężczyzna, który poinformował ich, że jego żona nie żyje w ich mieszkaniu od dwudziestu dziewięciu dni. Powiedział policji, że wcześniej nie powiedział o jej śmierci w obawie przed utratą mieszkania. Kiedy znaleziono zwłoki, zarówno muchy, jak i larwy zasiedliły ciało i rozpoczęła się mumifikacja . Zauważono również, że ciało było przykryte kocami, dzięki czemu temperatura ciała była wyższa niż temperatura pokojowa.
Podczas sekcji zwłok stwierdzono masę robaków w przewodzie pochwowym, włosach i pęcherzu moczowym. Niestety wiele robaków usunięto przed poinformowaniem entomologa. Chociaż głowa była umiarkowanie zmumifikowana, nie było skóry na twarzy, tkanek miękkich oczu, żuchwy, uszu i języka. Usta pozostały całkowicie otwarte, a czaszka była cała. Jednak po zdjęciu czapki czaszki w czaszce znaleziono dorosłego Protophormia terraenovae i jego larwy, ale brakowało mózgu. Protophomia terraenovae to gatunki najczęściej związane z ludźmi na obszarze sceny i wiadomo, że mają cykl życiowy w ciągu dziewiętnastu do dwudziestu trzech dni.
W tym przypadku znaleziono kilka dziwnych obserwacji. Po pierwsze, Protophormia terraenovae zwykle przepoczwarza się na zewnątrz ciała, z wyjątkiem sytuacji, gdy jest ono mokre lub znajduje się w jasnym świetle. Uważa się, że mucha została przypadkowo uwięziona; niemniej jednak warunki lęgowe były bardzo nietypowe. Po drugie, Protophormia terraenovae zazwyczaj pochodzą z ciał martwych od ponad miesiąca.
Zwłoki narkomana z pośmiertnymi zasinieniami w dwóch różnych miejscach
W sierpniu 1996 roku w zalesionym obszarze znaleziono martwego znanego narkomana. Testy toksykologiczne wykazały, że śmierć nastąpiła około trzech godzin po zażyciu heroiny. Zgłoszono również, że ciała nie widziano na dziewięć godzin przed ich przybyciem. Ubrane ciało pozostawiono odkryte na otwartej przestrzeni trawy.
Masy jaj znaleziono na powiekach zwłok. Po wyhodowaniu jaj ustalono, że gatunkiem był plujka Lucilia ampullacea , gatunek Lucilia rzadko spotykany wśród żywych ludzi na tym obszarze. Na ciele znaleziono również inne gatunki owadów, ale nie miały one znaczenia entomologicznego.
Sprawa zawiera kilka interesujących faktów, które należy wziąć pod uwagę podczas badania sprawy. Po pierwsze, gdyby jaja, robaki i owady zabrane z miejsca zdarzenia nie zostały wysuszone w torbie, a następnie wyrzucone, można by ustalić, czy ciało zostało umieszczone na miejscu zdarzenia późno w nocy, czy wcześnie rano. Również w tej chwili wpływ leków w organizmie na spożywające go owady jest nadal w toku. Ten przypadek pomaga w badaniu, ilustrując, że Lucilia ampullacea nie została odstraszona przez heroinę w organizmie. Wreszcie, jak widać na zdjęciach zrobionych na miejscu zdarzenia, muchy były na początkowych etapach rozwoju, co oznacza, że osoba zmarła w środku, a następnie została zabrana na zewnątrz. To nie jest nienormalne, że uzależniony od heroiny umiera i jest ignorowany przez przyjaciół, ponieważ uważa się, że śpi lub jest na złej wyprawie narkotykowej. Nierzadko zdarza się, że gdy wiadomo, że dana osoba nie żyje, przyjaciele z nią zostawiają ciało na zewnątrz, aby uniknąć przesłuchania i dochodzenia. Dowody entomologiczne i fakt, że ciała nie widziano na otwartej przestrzeni przez długi czas, potwierdzają tezę, że ciało początkowo było martwe w środku i wyniesione na zewnątrz.
Obecne badania
Obecnie prowadzone są badania mające na celu ustalenie, kiedy ciało zostało umieszczone na zewnątrz, czy to w dzień, czy w nocy. Na przykład porównując stadia rozwojowe Lucilii i Calliphora, powinno być możliwe rozróżnienie pory dnia. Uważa się, że Calliphora nie składa jaj w nocy, podczas gdy Lucilia to robi, więc oceniając późne stadia Lucilii i początkowe stadia Calliphora, można teoretyzować o czasie. Inny obszar badań, entomotoksykologia Entomotoksykologia , polega na zrozumieniu, co narkotyki, zarówno uliczne, jak i przepisane na receptę, robią z owadami po spożyciu zwłok, które połknęły narkotyk. Ponadto, czy lek odstrasza niektóre owady, czy też przyciąga je do organizmu.
Postęp, jaki dokonał się ostatnio, wynika z rozwoju technik, takich jak reakcja łańcuchowa polimerazy , PCR, w celu identyfikacji pozostałości. Naukowcom udało się wyizolować zawartość jelit owadów znalezionych na ciałach i zastosować techniki podobne do PCR w celu odzyskania mitochondrialnego DNA . To mitochondrialne DNA zostało wykorzystane do identyfikacji gatunku owada, a także szczątków ludzkich. Postępy w technologii, takie jak ta, pomogą rozwiązywać sprawy, zwłaszcza na późnym etapie rozkładu.