Elektroforeza hemoglobiny
 | |
| Elektroforeza hemoglobiny | |
|---|---|
| Schemat elektroforezy hemoglobiny alkalicznej, przedstawiający oczekiwane wyniki dla normalnej osoby dorosłej, zdrowego noworodka, osoby z niedokrwistością sierpowatokrwinkową , osoby z cechą sierpowatokrwinkową , osoby z chorobą hemoglobiny SC i próbki kontrolnej. | |
| Specjalność | Hematologia |
Elektroforeza hemoglobiny to badanie krwi , które może wykryć różne rodzaje hemoglobiny . Test może wykryć hemoglobinę S, postać związaną z niedokrwistością sierpowatokrwinkową , a także inne nieprawidłowe typy hemoglobiny, takie jak hemoglobina C. Można go również wykorzystać do badania talasemii , które są zaburzeniami spowodowanymi wadliwą produkcją hemoglobiny.
Procedura
Test wykorzystuje zasady elektroforezy żelowej do oddzielania różnych rodzajów hemoglobiny i jest rodzajem natywnej elektroforezy żelowej . Po obróbce próbki w celu uwolnienia hemoglobiny z krwinek czerwonych, jest ona wprowadzana do porowatego żelu (zwykle wykonanego z agarozy lub octanu celulozy ) i poddawana działaniu pola elektrycznego , najczęściej w środowisku alkalicznym . Różne hemoglobiny mają różne ładunki i zgodnie z tymi ładunkami poruszają się w żelu z różnymi prędkościami i ostatecznie tworzą oddzielne pasma (zob. wzorce migracji elektroforetycznej ). Próbka kontroli jakości zawierająca hemoglobiny A, F, S i C jest analizowana razem z próbką pacjenta, aby pomóc w identyfikacji różnych prążków. Względne ilości każdego rodzaju hemoglobiny można oszacować, mierząc gęstość optyczną prążków, chociaż ta metoda nie jest wiarygodna w przypadku hemoglobin występujących w małych ilościach.
Ponieważ hemoglobiny wykazują różne wzorce migracji w zależności od poziomu pH , badanie tej samej próbki zarówno przy kwaśnym, jak i zasadowym pH może pomóc zidentyfikować niektóre nieprawidłowe hemoglobiny, których w przeciwnym razie nie można by odróżnić od innych.
Znaczenie kliniczne
Krew dorosłego człowieka zwykle zawiera trzy rodzaje hemoglobiny: hemoglobinę A , która stanowi około 95% całości; hemoglobina A2 , która stanowi mniej niż 3,5%; i niewielką ilość hemoglobiny F . Jeśli obecne są nieprawidłowe warianty hemoglobiny, takie jak hemoglobina S (występująca w niedokrwistości sierpowatokrwinkowej ), C lub E , pojawią się one jako nieoczekiwane prążki w elektroforezie (pod warunkiem, że nie migrują w to samo miejsce, co inne hemoglobiny).
Elektroforezę hemoglobiny można również wykorzystać do badania talasemii , które są spowodowane zmniejszoną produkcją podjednostek cząsteczki hemoglobiny. Stężenia hemoglobiny A2 są zazwyczaj podwyższone w beta-talasemii mniejszej, a hemoglobina F może być nieznacznie podwyższona. W głównej postaci talasemii beta stężenie hemoglobiny A jest obniżone (lub w niektórych przypadkach jej brak), a stężenie hemoglobiny F jest znacznie podwyższone; A 2 poziomy są zmienne. W chorobie hemoglobiny H , postaci alfa-talasemii , można wykryć nieprawidłowy prążek hemoglobiny H, a czasem prążek Hemoglobiny Barts ; ale w przypadku łagodniejszej cechy alfa-talasemii wyniki elektroforezy są faktycznie normalne.
Historia
Linusowi Paulingowi przypisuje się wynalezienie elektroforezy hemoglobiny w 1949 r. Nowsze alternatywy dla konwencjonalnej elektroforezy hemoglobiny obejmują ogniskowanie izoelektryczne , elektroforezę strefową kapilarną i wysokosprawną chromatografię cieczową .