QuantiFERON

Testy uwalniania interferonu gamma ( IGRA ) są narzędziami diagnostycznymi do wykrywania utajonej gruźlicy (LTBI). Są zastępczymi markerami Mycobacterium tuberculosis i wskazują na komórkową odpowiedź immunologiczną na M. tuberculosis , jeśli ta ostatnia jest obecna.

Aktywna vs utajona gruźlica

Testy IGRA nie pozwalają na rozróżnienie między zakażeniem utajonym a aktywną gruźlicą (TB) i nie powinny być stosowane jako jedyna metoda diagnozowania aktywnej gruźlicy, którą jest diagnostyka mikrobiologiczna. Dodatni wynik IGRA niekoniecznie musi wskazywać na zakażenie gruźlicą, ale może być również spowodowany zakażeniem prątkami niegruźliczymi. Ujemny wynik IGRA nie wyklucza aktywnej gruźlicy; wiele badań wykazało, że nawet jedna czwarta pacjentów z aktywną gruźlicą ma negatywne wyniki IGRA.

Stan BCG

Ponieważ na IGRA nie ma wpływu status szczepienia Bacille Calmette-Guérin (BCG), IGRA są przydatne do oceny LTBI u osób zaszczepionych BCG, szczególnie w warunkach, w których szczepienie BCG jest podawane po niemowlęctwie lub podaje się wielokrotne (uzupełniające) szczepienia BCG. W przeciwieństwie do tego, specyficzność skórnego testu tuberkulinowego (TST) różni się w zależności od czasu podania BCG i tego, czy podano powtarzane (uzupełniające) szczepienia.

Komercyjny test IGRA

QuantiFERON , znany również jako QFT, jest zarejestrowanym znakiem towarowym testu uwalniania interferonu gamma (IGRA) do diagnostyki gruźlicy, produkowanego przez firmę QIAGEN . Test QFT-GIT jest ELISA testem krwi pełnej, który wykorzystuje peptydy z trzech antygenów TB (ESAT-6, CFP-10 i TB7.7) w formacie do probówki. Wynik podaje się jako oznaczenie ilościowe IFN-gamma w jednostkach międzynarodowych (IU) na ml. Osobnik jest uważany za pozytywny na obecność M. tuberculosis zakażenia, jeśli odpowiedź IFN-gamma na antygeny gruźlicy jest powyżej wartości granicznej testu (po odjęciu tła odpowiedzi IFN-gamma w kontroli negatywnej).

Test Mantoux vs IGRA

Ponieważ IGRA są bardziej kosztowne i bardziej skomplikowane pod względem technicznym niż test Mantoux , w swoim oświadczeniu politycznym z 2011 r. WHO nie zaleca zastąpienia testu Mantoux IGRA jako interwencji w zakresie zdrowia publicznego w krajach o niskich i średnich dochodach.

QuantiFERON-TB (QFT)

QuantiFERON-TB Gold In-Tube (QFT-GIT), test trzeciej generacji, zastąpił QuantiFERON-TB (QFT) i QuantiFERON-Gold, które nie są już sprzedawane.

Według amerykańskich Centrów Kontroli Chorób , w 2001 r. test QuantiFERON-TB (QFT) został zatwierdzony przez Food and Drug Administration (FDA) jako pomoc w wykrywaniu utajonej infekcji Mycobacterium tuberculosis . Ten test jest pomocą diagnostyczną in vitro, która mierzy składową komórkowej reaktywności immunologicznej na M. tuberculosis . Test opiera się na ilościowym oznaczeniu interferonu gamma (IFN-γ) uwalnianego z uczulonych limfocytów w pełnej krwi inkubowanej przez noc z oczyszczonym białkiem pochodna (PPD) z M. tuberculosis i antygeny kontrolne.

tuberkulinowa (TST) jest od lat stosowana jako pomoc w diagnozowaniu utajonego zakażenia gruźlicą (LTBI) i obejmuje pomiar reakcji nadwrażliwości typu opóźnionego 48–72 godzin po śródskórnym wstrzyknięciu PPD. TST i QFT nie mierzą tych samych składników odpowiedzi immunologicznej i nie można ich stosować zamiennie. Ocena trafności tych badań jest ograniczona brakiem standardu potwierdzania LTBI. [ potrzebne źródło ]

Jako test diagnostyczny QFT:

  1. wymaga flebotomii
  2. można wykonać już po jednej wizycie pacjenta
  3. ocenia odpowiedzi na wiele antygenów jednocześnie
  4. nie wzmacnia anamnestycznych odpowiedzi immunologicznych (patrz utajona gruźlica#wzmacnianie ).

W porównaniu z TST, wyniki QFT są mniej podatne na stronniczość i błędy czytelników. W wieloośrodkowym badaniu sponsorowanym przez CDC wyniki QFT i TST były umiarkowanie zgodne (całkowita wartość kappa = 0,60). Na poziom zgodności niekorzystnie wpłynęło wcześniejsze szczepienie Bacille Calmette-Guérin (BCG) , reaktywność immunologiczna na prątki niegruźlicze (NTM) oraz wcześniejszy dodatni TST. Oprócz badania wieloośrodkowego dwa inne opublikowane badania wykazały umiarkowaną zgodność między TST i QFT. Jednak jedna z pięciu witryn biorących udział w badaniu CDC zgłosiła mniejszą zgodność. Chociaż istnieją badania potwierdzające zwiększone przyszłe ryzyko czynnej gruźlicy u osób z dodatnim TST, to samo nie dotyczy osób z dodatnim wynikiem IGRA. Niedawno opublikowane badanie wykazało, że pozytywny wynik testu IGRA pozwala przewidzieć przyszłe ryzyko aktywnej gruźlicy. Co więcej, IGRA była co najmniej tak samo czuła i bardziej specyficzna w porównaniu z tradycyjnym TST. W tym badaniu immunokompetentnych, niedawno narażonych na bliskie kontakty z aktywnymi przypadkami gruźlicy, wskaźnik progresji do aktywnej choroby wśród nieleczonych osób z pozytywnym wynikiem QFT był znacznie większy niż w przypadku nieleczonych dodatnich TST (14,6% w porównaniu z 2,3%). Chociaż liczby były niewielkie, wszyscy z bliskich kontaktów, u których rozwinęła się aktywna gruźlica, mieli pozytywny wynik QFT, ale tylko 83% miało dodatni wynik TST. [ potrzebne źródło ]

Jak wspomniano powyżej, wcześniejsze szczepienie BCG może dawać fałszywie dodatnie wyniki TST. W badaniu personelu wojskowego powracającego z misji około połowa pozytywnych TST była fałszywie dodatnia. W nowszym badaniu wojskowych powracających z misji Franken i in. zgłoszono dowody sugerujące, że fałszywie dodatnie wyniki TST są powszechne i że test QFT może ukierunkować bardziej ukierunkowane leczenie i złagodzić niepotrzebne leczenie przeciwgruźlicze.

Punkt odcięcia FDA dla pozytywnego wyniku ustalono na > 0,34 jednostek międzynarodowych/mililitr (IU/ml), chociaż okazało się to funkcjonalnie problematyczne w obszarach o niskiej częstości występowania, na przykład wśród pracowników służby zdrowia w USA i Kanadzie. Na obszarach niskiego ryzyka i niskiej częstości występowania dodatnia wartość predykcyjna każdego testu jest zmniejszona. W przypadku pracowników służby zdrowia z Ameryki Północnej poddawanych seryjnym badaniom przesiewowym wyniki QFT tuż powyżej tego punktu odcięcia dają fałszywie dodatnie wyniki, które po powtórzeniu testu powracają do wyniku ujemnego, gdzie badania przesiewowe w kierunku gruźlicy są często wymagane co roku. Badania przeprowadzone na Uniwersytecie Stanforda i Administracji Weteranów dowiodły, że użycie strefy ponownego testowania (lub granicy) poniżej 1,1 IU/ml łagodzi 76% wyników fałszywie dodatnich lub rewersji.

Ograniczenia QFT obejmują konieczność pobrania krwi i przetworzenia jej w ciągu 16 godzin po pobraniu oraz ograniczone doświadczenie laboratoryjne i kliniczne z testem. Istnieje potrzeba dalszych badań użyteczności QFT w przewidywaniu progresji do aktywnej gruźlicy, szczególnie u dzieci i gospodarzy z obniżoną odpornością.

Na swoją niekorzyść, QFT może dawać fałszywie dodatnie wyniki w przypadku Mycobacterium szulgai , Mycobacterium kansasii i Mycobacterium marinum .

QuantiFERON-TB Gold

Test QuantiFERON-TB Gold (QFT-G) to test krwi pełnej do stosowania jako pomoc w diagnozowaniu zakażenia Mycobacterium tuberculosis , w tym utajonego zakażenia gruźlicą (LTBI) i gruźlicy (TB). Ten test został zatwierdzony przez amerykańską Agencję ds. Żywności i Leków (FDA) w 2005 roku.

Próbki krwi miesza się z antygenami (substancjami, które mogą wywołać odpowiedź immunologiczną) i kontrolami. Dla QFT-G antygeny obejmują mieszaniny syntetycznych peptydów reprezentujących dwa białka M. tuberculosis , ESAT-6 i CFP-10 . Po inkubacji krwi z antygenami przez 16 do 24 godzin mierzy się ilość interferonu gamma (IFN-gamma).

Jeśli pacjent jest zakażony prątkiem gruźlicy , jego białe krwinki uwalniają IFN-gamma w odpowiedzi na kontakt z antygenami gruźlicy . Wyniki QFT-G są oparte na ilości IFN-gamma, która jest uwalniana w odpowiedzi na antygeny.

Ocena kliniczna i dodatkowe badania (takie jak zdjęcie rentgenowskie klatki piersiowej , rozmaz plwociny i posiew) są potrzebne do rozróżnienia między rozpoznaniem gruźlicy utajonej a gruźlicy czynnej.

Zalety testu to:

  • Wymaga jednej wizyty pacjenta w celu pobrania próbki krwi.
  • Wyniki mogą być dostępne w ciągu 24 godzin.
  • Nie wzmacnia odpowiedzi mierzonych kolejnymi testami, co może się zdarzyć w przypadku skórnych testów tuberkulinowych (TST).
  • Nie podlega stronniczości czytelnika, która może wystąpić w przypadku TST.
  • Nie ma wpływu na wcześniejsze szczepienie BCG (bacille Calmette-Guérin).

Wady i ograniczenia testu to:

  • Próbki krwi muszą zostać przetworzone w ciągu 16 godzin po pobraniu, dopóki białe krwinki są nadal żywe.
  • Istnieją ograniczone dane dotyczące stosowania QFT-G u dzieci w wieku poniżej 17 lat, wśród osób niedawno narażonych na zakażenie M. tuberculosis oraz u osób z obniżoną odpornością (np. upośledzona funkcja immunologiczna spowodowana zakażeniem wirusem HIV lub zespołem nabytego niedoboru odporności [AIDS]) aktualne leczenie lekami immunosupresyjnymi, wybrane zaburzenia hematologiczne, określone nowotwory złośliwe, cukrzyca, pylica krzemowa i przewlekła niewydolność nerek ).
  • Błędy w pobieraniu lub transporcie próbek krwi lub w przeprowadzaniu i interpretacji testu mogą zmniejszyć dokładność QFT-G.
  • Zmienność, duży problem, który wpływa niekorzystnie na wynik. Do dokładnego pomiaru odpowiedzi QFT potrzebna będzie większa automatyzacja.
  • Ograniczone dane dotyczące stosowania QFT-G w celu określenia, kto jest narażony na ryzyko rozwoju gruźlicy.

Złota rurka QuantiFERON-TB

W dniu 10.10.2007 amerykańska FDA wydała zgodę na wprowadzenie do obrotu w USA tubki Quantiferon TB Gold In Tube

FDA stwierdza:

Zatwierdzenie modyfikacji quantiferon-tb gold do systemu pobierania w probówce, który składa się z trzech probówek do pobierania krwi, zerowej, antygenu TB i mitogenu. Zmodyfikowane urządzenie będzie sprzedawane pod nazwą handlową quantiferon-tb gold in-tube i jest wskazane do stosowania jako test diagnostyczny in vitro z użyciem koktajlu peptydowego symulującego białka esat-6, cfp-10 i tb 7.7(p4) do stymulacji komórek w heparynizowanej krwi pełnej pobranej bezpośrednio do specjalistycznych probówek do pobierania krwi. Wykrywanie interferonu-γ za pomocą testu immunoenzymatycznego (elisa) stosuje się do identyfikacji odpowiedzi in vitro na te antygeny peptydowe, które są związane z infekcją Mycobacterium tuberculosis.

Zgodnie z zatwierdzoną przez FDA ulotką dołączoną do opakowania, Quantiferon TB Gold In Tube ma spójną swoistość >99% u osób niskiego ryzyka i czułość sięgającą 92% u osób z aktywną chorobą, w zależności od miejsca i stopnia zaawansowania choroby. Swoistość w dwóch badaniach na kilkuset osobach wynosi 96-98% w zdrowej populacji uodpornionej.

Ulotka dołączona do opakowania informuje również, że zestaw zawiera trzy probówki do pobierania, których ścianki wyschły na antygenach i że probówki te należy przenieść do inkubatora w ciągu 16 godzin od pobrania krwi.

W dniu 25 czerwca 2010 r. Amerykańskie Centra Kontroli i Zapobiegania Chorobom (CDC) zaktualizowały wytyczne dotyczące testów na gruźlicę, dostarczając wskazówek urzędnikom ds. Zaktualizowane wytyczne wyznaczają nowy kierunek zwalczania gruźlicy w USA.

Wcześniej QuantiFERON®-TB Gold można było stosować bez preferencji w każdej sytuacji, w której stosowano skórny test tuberkulinowy (TST). Wytyczne z 2010 roku ustanawiają nowy punkt odniesienia, ponieważ zalecają IGRA jako preferowaną metodę badania gruźlicy u wielu pacjentów, w tym tych, którzy są zaszczepieni BCG lub którzy prawdopodobnie nie wrócą na badanie TST. [ potrzebne źródło ]

Dostępność

W Stanach Zjednoczonych test jest szeroko dostępny w stanowych laboratoriach zdrowia publicznego, szpitalach i laboratoriach komercyjnych .

W styczniu 2008 r. CDC poinformowało - za pośrednictwem biuletynu TB Notes - osoby kontrolujące gruźlicę i inne osoby o link do listy laboratoriów w USA i Kanadzie oferujących wykonanie testu Quantiferon Gold.

Kalifornijskie Stowarzyszenie Kontrolerów Gruźlicy dostarczyło również listę laboratoriów zdrowia publicznego w Kalifornii, które testują Quantiferon.

Pobrano z „ https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=QuantiFERON&oldid=1140495128 ”