Immunofiksacja

Immunofiksacja umożliwia wykrywanie i typowanie przeciwciał monoklonalnych lub immunoglobulin w surowicy lub moczu . Ma to ogromne znaczenie w diagnostyce i monitorowaniu niektórych chorób związanych z krwią, takich jak szpiczak .

Zasada

Metoda wykrywa przez wytrącanie : kiedy rozpuszczalny antygen (Ag) wchodzi w kontakt z odpowiednim przeciwciałem , następuje wytrącanie, które może być widoczne gołym okiem lub pod mikroskopem. [ potrzebne źródło ]

Immunofiksacja najpierw rozdziela przeciwciała w mieszaninie w zależności od ich specyficznej ruchliwości elektroforetycznej . W celu identyfikacji stosuje się antysurowice specyficzne dla docelowych przeciwciał.

W szczególności immunofiksacja umożliwia wykrycie przeciwciał monoklonalnych reprezentatywnych dla chorób takich jak szpiczak lub makroglobulinemia Waldenströma .

Technika

Technika polega na umieszczeniu próbki surowicy (lub wcześniej zagęszczonego moczu) na żelu. Po przyłożeniu prądu elektrycznego, który umożliwia rozdział białek według ich wielkości, na żel nakłada się przeciwciała specyficzne dla każdego typu immunoglobulin . Wydaje się więc, że na żelu są mniej lub bardziej wąskie prążki, na których znajdują się różne immunoglobuliny. [ potrzebne źródło ]

Immunofiksacja jako immunoelektroforeza odbywa się w dwóch etapach:

  • Pierwszy krok jest identyczny dla obu technik. Polega na osadzeniu immunoglobulin zawartych w surowicy lub moczu na żelu, a następnie rozdzieleniu immunoglobulin według ich ruchliwości elektroforetycznej poprzez spowodowanie ich migracji pod wpływem pola elektrycznego. Ta migracja zależy od masy i ładunku antygenu. Po rozdzieleniu immunoglobulin możemy przejść do następnego kroku.
  • Drugi krok opiera się na zastosowanej technice. Immunofiksacja wymaga elektroforezy w celu migracji białek surowicy w powtórzeniu. Następnie do traktowania każdej kontrpróby stosuje się swoiste antysurowice antyimmunoglobulinowe. W tym celu antysurowice nie są umieszczane w kanale, jak w elektroforezie, ale są dodawane indywidualnie do każdej ścieżki migracji. Obecność immunoglobuliny monoklonalnej powoduje pojawienie się wąskiego prążka po wybarwieniu złożonych osadów. Na przykład, w przypadku lambda IgG, pojawi się wąski prążek, zarówno na ścieżce, na której zdeponowano anty-G, jak i na ścieżce, na której zdeponowano anty-lambda.

zasługi

Immunofiksacja zwykle zastępuje elektroforezę białek, ponieważ: [ potrzebne źródło ]

  • jest szybszy (wyniki w ciągu trzech godzin);
  • jest nieco bardziej czuły. Immunofiksacja może ujawnić immunoglobulinę pominiętą w elektroforezie białek, zwłaszcza przy niskich stężeniach (mniej niż 1 gram/litr);
  • może być częściowo zautomatyzowany i może być używany w większej liczbie laboratoriów;
  • jest łatwiejszy do odczytania i zinterpretowania.

wady

Immunofiksacja jest jednak wrażliwa tylko na immunoglobuliny i jest droższa niż elektroforeza białek.

Zobacz też

Źródła


Linki zewnętrzne


Pobrane z „ https://en.wikipedia.org/w/index.php?title=Immunofixation&oldid=1138426293 ”