Próba cytrynianowa
Test cytrynianowy wykrywa zdolność organizmu do wykorzystania cytrynianu jako jedynego źródła węgla i energii.
Zasada
Bakterie inokuluje się na pożywce zawierającej cytrynian sodu i wskaźnik pH , taki jak błękit bromotymolowy . Pożywka zawiera również nieorganiczne sole amonowe, które są wykorzystywane jako jedyne źródło azotu. Stosowanie cytrynianu obejmuje enzym liazę cytrynianową, która rozkłada cytrynian na szczawiooctan i octan . Szczawiooctan jest dalej rozkładany na pirogronian i dwutlenek węgla (CO 2 ). Produkcja wodorowęglanu sodu (NaHCO 3 ) oraz amoniaku (NH 3 ) z zastosowania cytrynianu sodu i soli amonowych powoduje odczyn alkaliczny. Powoduje to zmianę barwy podłoża z zielonej (neutralnej) na niebieską (zasadową).
Kolonie bakteryjne zbiera się z prostego drutu i inokuluje na zboczu agaru cytrynianowego Simmonsa i inkubuje przez noc w temperaturze 37°C. Nie zaleca się inokulacji z kultury bulionowej, ponieważ inokulum byłoby zbyt ciężkie. Jeśli organizm ma zdolność wykorzystywania cytrynianu, podłoże zwykle zmienia kolor z zielonego na niebieski, chociaż wzrost na podłożu nawet bez zmiany koloru jest uważany za wynik pozytywny. Obserwacja braku wzrostu jest wynikiem ujemnym.
Przykłady:
- Escherichia coli : Negatywny
- Klebsiella pneumoniae : pozytywny
- Frateuria aurantia : pozytywny