IMViC

Testy IMViC to grupa pojedynczych testów stosowanych w laboratoriach mikrobiologicznych do identyfikacji drobnoustrojów z grupy coli . Bakteria grupy coli to gram-ujemna , tlenowa lub względnie beztlenowa pałeczka, która wytwarza gaz z laktozy w ciągu 48 godzin. Obecność niektórych bakterii z grupy coli wskazuje na zanieczyszczenie kałem.

Termin „IMViC” jest akronimem każdego z tych testów. „I” oznacza test indolowy ; „M” oznacza test czerwieni metylowej ; „V” oznacza Vogesa-Proskauera , a „C” oznacza test cytrynianowy . Mała litera „i” oznacza jedynie „w”, ponieważ test cytrynianowy wymaga umieszczenia próbek bakterii z grupy coli „w cytrynianie”.

Testy te są przydatne w rozróżnianiu przedstawicieli Enterobacteriaceae .

Wyniki IMViC

Próba indolowa

W tym teście badany organizm hoduje się w bulionie wodnym z peptonem. Zawiera tryptofan , który pod działaniem enzymu tryptofanazy przekształca się w cząsteczkę indolu , pirogronian i amoniak. Indol jest następnie ekstrahowany z bulionu za pomocą ksylenu. Bulion sterylizuje się przez 15 minut w około 121°C. Aby przetestować bulion pod kątem produkcji indolu, odczynnik Kovaca . Odczynnik Kovaca składa się z alkoholu amylowego i para-dimetyloaminobenzaldehydu oraz stężonego kwasu solnego. Odczynnik Kovaca jest faktycznie używany do określenia zdolności organizmu do oddzielenia indolu od aminokwasu tryptofanu i jest dodawany po inkubacji. Wynik pozytywny jest wskazywany przez różowo-czerwoną warstwę tworzącą się na powierzchni płynu.

Czerwień metylowa i test Vogesa-Proskauera

Oba te testy wykorzystują ten sam bulion do wzrostu bakterii. Bulion nazywa się bulionem MRVP. Po wzroście bulion rozdziela się na dwie różne probówki, jedną do testu czerwieni metylowej (MR) , a drugą do testu Vogesa-Proskauera (VP) .

Test czerwieni metylowej wykrywa wytwarzanie kwasów powstających podczas metabolizmu z wykorzystaniem szlaku fermentacji mieszanych kwasów z wykorzystaniem pirogronianu jako substratu. Wskaźnik pH czerwień metylowa jest dodawana do jednej probówki i przy pH niższym niż 4,2 pojawia się czerwony kolor, co wskazuje na pozytywny wynik testu (stosowana jest mieszana fermentacja kwasowa). Pozostały żółty roztwór (pH = 6,2 lub więcej) wskazuje na negatywny wynik testu, co oznacza, że ​​zastosowano fermentację butanodiolową .

Test VP wykorzystuje alfa-naftol i wodorotlenek potasu do badania obecności acetylometylokarbinolu (acetoiny), związku pośredniego szlaku fermentacji 2,3-butanodiolu. Po dodaniu obu odczynników, probówkę energicznie wstrząsa się, a następnie pozostawia na 5-10 minut. Różowawo-czerwony kolor wskazuje na pozytywny wynik testu, co oznacza, że ​​zastosowano szlak fermentacji 2,3-butanodiolu.

Próba cytrynianowa

Ten test wykorzystuje agar cytrynianowy Simmona do określenia zdolności mikroorganizmu do wykorzystania cytrynianu jako jedynego źródła węgla. Agar zawiera jako wskaźnik jony cytrynianowe i amonowe (źródło azotu) oraz błękit bromotymolowy . Agar cytrynianowy jest zielony przed inokulacją i zmienia kolor na niebieski jako pozytywny wskaźnik testu, co oznacza, że ​​cytrynian został wykorzystany.

Stosowanie

Te testy IMViC są przydatne do różnicowania rodziny Enterobacteriaceae , zwłaszcza gdy są stosowane razem z testem ureazy .

Wyniki IMViC niektórych ważnych gatunków przedstawiono poniżej.

Gatunek	Indol	czerwień metylowa	Voges-Proskauer	Cytrynian
Escherichia coli	Pozytywny	Pozytywny	Negatywny	Negatywny
Staphylococcus aureus	Negatywny	Pozytywny	Pozytywny	Negatywny
Shigella spp.	Negatywny	Pozytywny	Negatywny	Negatywny
Salmonella spp.	Negatywny	Pozytywny	Negatywny	Pozytywny
Klebsiella spp.	Negatywny	Negatywny	Pozytywny	Pozytywny
Proteus vulgaris	Pozytywny	Pozytywny	Negatywny	Negatywny
Proteus mirabilis	Negatywny	Pozytywny	Negatywny	Pozytywny
Citrobacter freundii	Negatywny	Pozytywny	Negatywny	Pozytywny
Enterobacter aerogenes	Negatywny	Negatywny	Pozytywny	Pozytywny