odczynnik Ellmana

odczynnik Ellmana

Nazwy
Preferowana nazwa IUPAC Kwas 5,5′-disulfanodiylobis(2-nitrobenzoesowy)
Inne nazwy Kwas 3,3′-disulfanodiylobis(6-nitrobenzoesowy) Kwas 5-(3-karboksy-4-nitrofenylo)disulfanylo-2-nitrobenzoesowy Kwas ditiononitrobenzoesowy Kwas 5,5′-ditiobis(2-nitrobenzoesowy)
Identyfikatory
Numer CAS	69-78-3   Y
Model 3D ( JSmol )	Interaktywny obraz
Skróty	DTNB
CHEBI	CHEBI:86228   Y
CHEMBL	ChEMBL395814   Y
ChemSpider	6018   Y
Karta informacyjna ECHA	100.000.650
Numer WE	200-714-4
Identyfikator klienta PubChem	6254
UNII	9BZQ3U62JX   Y
Pulpit nawigacyjny CompTox ( EPA )	DTXSID5058779
InChI InChI=1S/C14H8N2O8S2/c17-13(18)9-5-7(1-3-11(9)15(21)22)25-26-8-2-4-12(16(23)24) 10(6-8)14(19)20/h1-6H,(H,17,18)(H,19,20)   T Klucz: KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYSA-N   Y InChI=1/C14H8N2O8S2/c17-13(18)9-5-7(1-3-11(9)15(21)22)25-26-8-2-4-12(16(23)24) 10(6-8)14(19)20/h1-6H,(H,17,18)(H,19,20) Klucz: KIUMMUBSPKGMOY-UHFFFAOYAD
UŚMIECH c1cc(c(cc1SSc2ccc(c(c2)C(=O)O)[N+](=O)[O-])C(=O)O)[N+](=O)[O-]
Nieruchomości
Wzór chemiczny	C14H8N2O8S2 _ _ _ _ _ _ _ _ _
Masa cząsteczkowa	396,34 g·mol -1
Temperatura topnienia	240 do 245 ° C (464 do 473 ° F; 513 do 518 K) (rozkłada się)
Zagrożenia
Oznakowanie GHS :
Piktogramy
Hasło ostrzegawcze	Ostrzeżenie
Zwroty wskazujące rodzaj zagrożenia	H315 , H319 , H335
Zwroty wskazujące środki ostrożności	P261 , P264 , P271 , P280 , P302+P352 , P304+P340 , P305+P351+P338 , P312 , P321 , P332 + P313 , P337 + P313 , P362 , P403+P233 , P405 , P50 1
O ile nie zaznaczono inaczej, dane podano dla materiałów w stanie normalnym (przy 25°C [77°F], 100 kPa).   Y ( co to jest Y N ?) Referencje w infoboksie

Odczynnik Ellmana (kwas 5,5′-ditiobis-(2-nitrobenzoesowy) lub DTNB ) jest substancją chemiczną stosowaną do ilościowego oznaczania liczby lub stężenia grup tiolowych w próbce. Został opracowany przez George'a L. Ellmana.

Przygotowanie

W oryginalnym artykule Ellmana przygotował ten odczynnik przez utlenienie 2-nitro-5-chlorobenzaldehydu do kwasu karboksylowego, wprowadzenie tiolu przez siarczek sodu i sprzęganie monomeru przez utlenianie jodem . Obecnie odczynnik ten jest łatwo dostępny w handlu.

próba Ellmana

Tiole reagują z tym związkiem, rozszczepiając wiązanie dwusiarczkowe , dając 2-nitro-5-tiobenzoesan (TNB ^- ), który jonizuje do dianionu TNB ^{2 -} w wodzie o obojętnym i zasadowym pH. Ten jon TNB ²⁻ ma żółty kolor.

Reakcja DTNB z tiolem (R-SH).

Ta reakcja jest szybka i stechiometryczna, a dodanie jednego mola tiolu uwalnia jeden mol TNB. TNB ^2- oznacza się ilościowo w spektrofotometrze , mierząc absorbancję światła widzialnego przy 412 nm, stosując współczynnik ekstynkcji 14 150 M ^-1 cm ^-1 dla rozcieńczonych roztworów buforowych i współczynnik 13 700 M ^-1 cm ^-1 dla wysokich stężenia soli, takie jak 6 M chlorowodorek guanidyny lub 8 M mocznik. Niestety, współczynnik ekstynkcji dla roztworów rozcieńczonych został niedoszacowany w oryginalnej publikacji z 1959 r., jako 13 600 M ^-1 cm ^-1 , i jak zauważono w niedawnym artykule, ten błąd utrzymuje się w literaturze. Komercyjny DTNB może nie być całkowicie czysty, więc może wymagać rekrystalizacji w celu uzyskania całkowicie dokładnych i powtarzalnych wyników.

Odczynnik Ellmana może być używany do pomiaru tioli o małej masie cząsteczkowej, takich jak glutation, zarówno w czystych roztworach, jak iw próbkach biologicznych, takich jak krew. Może również mierzyć liczbę grup tiolowych w białkach.

Linki zewnętrzne

• Oznaczanie ilościowe sulfhydryli DTNB, odczynnik Ellmana (wykorzystuje nieprawidłowy współczynnik absorbancji)